CAR-T细胞培养基是一种即用型化学成分,无动物成分的培养基。 它被优化和设计用于人源T细胞的培养,并推荐用于人T淋巴细胞的培养和扩增。 在源自人外周血单核细胞的CD3+T淋巴细胞上评估该培养基的性能。T细胞培养基旨在与细胞因子补充剂一起用于T淋巴细胞的离体培养。 使用的细胞因子混合物取决于每个使用者的实验要求。
本发明还提供了一种CAR-T细胞的培养方法,采用本发明培养基培养CAR-T细胞,该培养基包括IL-2、IL-7、IL-15、B27、自体血浆和X-vivo15培养基;作为优选,培养基以1L计算,包括以下成分: IL-2 300-2000IU/ml IL-7 100-1000IU/ml IL-15 50-1000IU/ml B27 1%-5% 自体血浆 1%-5% X-vivo15 补足 在本发明提...
除了细胞因子外,如FBS等培养补充剂也在支持T细胞扩增中发挥关键作用,尽管定义的培养基组成正在迅速取代如FBS等成分,以实现更精确的配方和降低人畜共患病病原体的风险。最后,最近的研究探索了使用各种药理学补充剂来促进理想的T细胞表型,并增强最终CAR-T细胞产品的治疗效果。例如,酪氨酸激酶抑制剂达沙替尼已在CAR-T细胞...
生产CAR-T时所用的T细胞富集手段一般是单抗磁珠富集法,T细胞通过CD4/CD8特异性抗体或者表面标记偶联磁珠进行分离,然后加入CD3/CD28单克隆抗体磁珠或人工抗原提呈细胞等对细胞培养基中的T细胞进行激活,这其实是模拟正常身体环境中树状细胞对休眠T细胞的刺激,并使其迅速活化。因为仅有活化后的T细胞能够快速分裂,且T细胞...
一种car-t细胞培养用的培养基,包括基本培养基和达托霉素。[0007]优选的,达托霉素的使用浓度为20~100μm。更优选的,达托霉素的使用浓度为50~100μm。[0008]优选的,基本培养基为:10%体积比的胎牛血清、100u/ml的青霉素、100μg/ml的链霉素以及200u/ml的白介素2(il-2),余量为rpmi 1640培养基。[0009]本...
嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞) chimeric antigen receptor T cell,CAR-T cell 经过基因工程修饰的,可表达被导入的含有抗原识别片段、T细胞受体活化分子、共刺激信号等信号分子的CAR基因的T细胞。 3.2 外周血单个核细胞peripheral blood mononuclear cell;PBMC
培养体系:IMDM基础培养基+200IU/ML IL-2 四种培养方式和不同营养成分培养T细胞 10天后不同T细胞的比例 培养方式 Dynabeads,PBMC:培养基中添加偶联CD3,CD28的Dynabeads刺激PBMC Soluble Ab,PBMC:培养基中添加CD3,CD28抗体刺激PBMC Crosslinke...
CAR-T细胞生产用材料是指用于制备该细胞治疗产品的物质或材料,包括细胞、基因修饰用载体物质、培养基、细胞因子、各种添加成分、冻存液和辅料等。生产用材料直接关系到产品的质量,因此研究者应建立良好、规范的生产用材料的质量管理体系,包括...
研究表明,调整培养基成分可以改善CAR-T细胞的表型,其中IL-7和IL-15相较于IL-2更能有效防止T细胞分化。为了增加CAR-T细胞产品中记忆表型T细胞比例并减少T细胞耗竭,一些研究在CAR-T细胞制备过程中使用了T细胞信号通路的小分子抑制剂。有研究表明,AKT抑制能够产生富含TSCM或TCM的CAR-T细胞产品,这些产品在白血病的临床前...