CAR-T细胞具备特异性杀伤功能。为了在体外证明这种特异性,首先将抗CD19 CAR转导的T细胞或供体匹配的模拟转导T细胞用于Incucyte® 免疫细胞杀伤试验。在收集图像的同时,分别于第2天、第4天和第7天取样,在iQue® 高通量流式细胞仪上利用iQue® 人类T细胞活化试剂盒和iQue®人类T细胞杀伤试剂盒评估了表型和功能,并...
一、CAR-T细胞活化 当CAR-T细胞识别肿瘤抗原并与肿瘤细胞结合时，细胞因子、穿孔素和颗粒酶的释放，会导致肿瘤细胞和周围间质中的细胞死亡（Benmebrarek et al.）。这些细胞因子可包括IFNγ、TNFα、IL-2和IL-8。在模拟CAR-T治疗的共培养体外模型系统中，可以在细胞上清液检测到。Von Scheidt等使用AlphaLISA检测了...
此外，CAR-T细胞治疗实体瘤，首先是CAR-T细胞能够在病人体内被肿瘤抗原刺激，从而激活CAR-T细胞进行大量扩增，这是发挥CAR-T细胞消除肿瘤细胞的前提。如何克服实体瘤免疫抑制微环境对T细胞激活和杀伤功能的抑制，同时增强CAR-T细胞在肿瘤组织的浸润能力是需要解决的关键问题，当然找到更多的适合CAR-T细胞治疗的靶点也是CAR-...
CAR-T细胞具备特异性杀伤功能。为了在体外证明这种特异性,首先将抗CD19 CAR转导的T细胞或供体匹配的模拟转导T细胞用于Incucyte® 免疫细胞杀伤试验。在收集图像的同时,分别于第2天、第4天和第7天取样,在iQue® 高通量流式细胞仪上利用iQue® 人类T细胞活化试剂盒和iQue®人类T细胞杀伤试剂盒评估了表型和功能,并...
接着，针对细胞骨架力学特性对于 T 细胞功能的影响，课题组也进行了研究。期间，他们把 CAR-T 细胞放在拥有不同力学特性的细胞骨架中，将其提取出来之后，再来观察它们对于肿瘤细胞的杀伤能力。（来源：Nature Biomedical Engineering）就这项研究的意义来说：其一，目前针对细胞和分子生物学的研究，大多使用体外细胞培养...
“这项研究能直接用于提升 T 细胞疗法和 CAR-T 细胞疗法的功效。具体来说,我们搭建了一款细胞骨架模型,能用于研究细胞骨架力学性质对于其他种类细胞的影响,进而能为细胞疗法的发展或揭示相关机理带来促进作用,以及为药物研发提供指导。”哈佛大学博士生刘禹彤表示。
CAR-T细胞体外杀伤实验通常是将CAR-T细胞和靶细胞共孵育,然后进行一系列的评估。靶细胞有两种来源,一类是天然表达抗原的肿瘤细胞系,还有一类是人为构建的表达抗原阳性的稳转细胞株。人为构建稳转株的主要方式是慢病毒法,构建好病毒载体后,转染细胞(如293T细胞),使细胞正常表达或者过表达抗原。
体外CAR-T或T细胞的活化可以使用AlphaLISA和HTRF等均相检测技术检测IFNγ来评估。方法简单,灵敏,稳定,以最少的样本消耗最快的获得结果。此外,共培养实验中的靶细胞死亡可以使用DELFIA EuTDA细胞毒性试剂来检测。稳定的荧光替代更传统的Cr51释放检测。 相关推荐 ...
接着,针对细胞骨架力学特性对于 T 细胞功能的影响,课题组也进行了研究。期间,他们把 CAR-T 细胞放在拥有不同力学特性的细胞骨架中,将其提取出来之后,再来观察它们对于肿瘤细胞的杀伤能力。 (来源:Nature Biomedical Engineering) 就这项研究的意义来说:
体外CAR-T或T细胞的活化可以使用AlphaLISA和HTRF等均相检测技术检测IFNγ来评估。方法简单,灵敏,稳定,以最少的样本消耗最快的获得结果。此外,共培养实验中的靶细胞死亡可以使用DELFIA EuTDA细胞毒性试剂来检测。稳定的荧光替代更传统的Cr51释放检测。 相关推荐 ...