CAR-T疗法(嵌合抗原受体T细胞免疫)的原理是,自分离患者体内T细胞,基因工程技术为T细胞插入能识别肿瘤细胞并激活T细胞的嵌合抗原受体(即CAR),再将经过扩增的CAR-T细胞回输到患者体内,到达其攻击表达相关抗原的肿瘤细胞,是细胞过继治疗(ACT)的方法之一。 2017年,美国食品与药品监督管理局(FDA)批...
CAR-T疗法在血液肿瘤临床治疗上取得成功案例激励着学界努力摸索新的免疫细胞疗法。近几年,自然杀伤细胞(natural killer cell,NK) 成为下一个被基因工程改造的对象。NK细胞是一种天然免疫细胞,具有与T细胞完全不同的靶细胞识别方式,能泛特异性识别并杀死瘤细胞。外周血中大约90% NK细胞...
CAR-T细胞免疫疗法的临床前研究,是成药中关键且漫长的一步,包括了靶点发现、抗体的开发、scFv筛选、CAR-T细胞的构建、CAR-T细胞体外抗肿瘤活性和CAR-T细胞体内抗肿瘤活性评估等多个重要环节。 流式细胞术是一种可对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选的技术,由于其高效、简便、准确等特点,已经广泛应用于CAR-T细...
体外实验结果表明,在共培养体系中,CAR-T细胞只有在与肿瘤细胞相互接触的情况下才会发生CD19抗原转移,更进一步研究者使用基因编辑技术将NALM6细胞表面的CD19抗原更换成了mCherry-CD19,通过流式细胞分选技术证明了CAR-T细胞对肿瘤细胞的胞啃作用是导致肿瘤细胞发生抗原转移的重要机制。 但是,胞啃作用导致的肿瘤抗原丢失和转...
实现CAR在T细胞上的表达,是CAR-T生产的核心技术,这一步需要利用到载体将CAR基因导入T细胞。理想的载体应该具有较高的基因转染效率、稳定性好,不引起机体免疫反应等特点。 目前有多种方法用于T细胞修饰,包括病毒载体转导(如γ-逆转录病毒、慢病毒载体等)及非病毒载体转染(转座子转染、电穿孔等技术等)。
TCR-T细胞疗法的工作流程 为了分离治疗性TCR,必须首先从患者或健康献血者的血液中分离抗原特异性T细胞,并在体外用特异性肽抗原以及细胞因子(如IL-2和IL-15)进行扩增。这一过程需要事先确定可安全靶向于患者的特定肿瘤相关肽靶点。在选择了靶抗原后,可以使用不同的方法来筛选具有所需的高亲和力和肿瘤特异性的TCR。临...
CAR 是一种经过基因工程改造的细胞表面受体,能够使免疫细胞特异性地靶向肿瘤细胞表面的抗原蛋白。CAR - T 细胞(经基因工程改造的 T 细胞)、CAR 自然杀伤细胞(CAR natural killer,CAR - NK)和 CAR 巨噬细胞(CAR macrophages,CAR - M)都是基于 CAR 技术的创新细胞疗法。其中,CAR - T 疗法在恶性 B 细胞肿瘤...
流式单B细胞筛选平台 • 1天内完成所有B细胞分选 • 保留天然配对的scFv分子 杂交瘤技术平台 • 项目成功率>90% • 成熟技术获得高特异性scFv分子 CAR候选分子筛选 scFv抗体亲和力检测 (SPR/BLI) scFv是CAR-T细胞特异性识别肿瘤细胞的关键,其对抗原的亲和力和特异性影响着CAR-T的有效性和安全性。义翘神州...
患者于2024年2月14日进行CAR-T回输,回输后14天即达到MRD阴性,3月中旬的复查结果表明,CAR-T细胞扩增非常好,疗效迅速,患者缓解情况良好,达到CR状态,且骨髓流式检测MRD阴性。该例患者在整个治疗过程顺利,仅出现2天低热,且治疗后体温很快恢复正常,细胞因子释放综合征(CRS)程度仅为1级,而且无其他不良反应,整体安全性...
另一种是解除肿瘤对免疫的耐受/屏蔽作用,让免疫细胞重新认识肿瘤细胞,对肿瘤产生攻击,例如PD-1抗体、PD-L1抗体、CTLA-4抗体等。临床上将不同的免疫疗法联合应用效果有可能会更好。 目前有三种使用效应T细胞的过继细胞疗法(Adoptivecellulartherap,ACT)正朝着注册审批的方向行进(图1)。