目前关于CAR-NK细胞的报道显示,多种启动子被用于驱动CAR的表达,无论是细胞系来源的还是原代NK细胞。在原代CAR-NK和CAR-NK细胞系中,病毒启动子(CMV、MPSV、MMLV、SFFV等)比组成性活性启动子(如EF1α、CMV和PGK)更常用。 信号肽 在信号肽中存在着巨大的异质性,这直接转化为不同水平的蛋白质分泌效率。对于CAR-N...
携带RD114包膜的α逆转录病毒对原代NK细胞的转导效率优于γ逆转录病毒和慢病毒,虽然使用不同的逆转录病毒可以在NK细胞中实现长时间稳定的CAR表达,但逆转录病毒系统的安全性仍然是一个问题,特别是与更安全的慢病毒相比。 电穿孔 随着技术的进步,与质粒相比利用高纯度和mRNA进行电转可以提高NK的转染效率,但是缺点是CAR...
尽管成熟NK细胞的体外扩增率相对较低(2-4倍),需要通过抽血来获得足够的CAR NK细胞数量(每次输液的CAR NK细胞总数从1×107到2×109/kg体重不等),但在UCBs、iPSCs和hESCs的情况下,基于供体细胞或无供体的扩增方案能够实现超过2000倍的扩展能力。如果是NK...
随着 NK 细胞疗法研究进展加速,有业内人士认为,未来 NK 细胞疗法有可能超越 CAR-T 细胞疗法,对血液瘤和实体瘤呈现出更有前景的疗效。CAR-NK 有望成为继 CAR-T 之后最令人期待的工程细胞疗法之一。 1、与CAR-T细胞不同,CAR-NK细胞保留了通过其天然受体识别和靶向肿...
目前Nkarta主要有两款产品处于临床研究阶段,分别是NKX101和NKX019,并在早期临床研究中获得了不错的数据,产品结构设计如下: NKX101为靶向NKG2D配体的异体CAR-NK细胞产品,约80%-100%的AML样本表达NKG2D配体。2022年4月,一项NKX101治疗复发/难治AML临床研究中,高剂量组1B*3和1.5B*3共5例患者,3例CR。未见DLT,未...
CAR结构的设计 载体骨架和启动子 载体骨架包含表达CAR所需的所有元件,如启动子、polyA信号和转录调控片段。启动子的选择直接影响到转基因的表达水平。目前,对不同启动子在NK细胞系中的CAR表达和功能的比较只有一次报道,而对原代NK细胞没有比较数据。就这一次单个报告来看,还不能确定CAR-NK细胞的最佳启动子。目前关于...
CAR结构是工程T细胞或NK细胞疗法的关键。针对靶向实体瘤的痛点,逐渐发展出了百花齐放的局面。 整体来说CAR-NK的CAR结构主干和CAR-T的是相似的,只是在跨膜和ICS结构域方面有更多变化,例如采用aNKR的胞外结构域替换scFv等(17个NK细胞抗肿瘤靶点),在靶向性抗原的选择上也有重合(4类表达“NK细胞受体”的T细胞)。
NK细胞来源(源自Leisheng Zhang, et al.) CAR结构设计 嵌合抗原受体(CAR)是一种受体蛋白,它赋予免疫细胞新的能力,以靶向特定的抗原蛋白。CAR一般有三部分组成:胞外结构域、跨膜区及胞内信号结构域。胞外结构域由信号肽和识别抗原的单链抗体片段(scFv)组成。胞内信号结构域,如CD28、4-1BB(CD137)和OX40,通常...
4、间充质干细胞，如脐带血，这也是目前国内外公司研发主要使用的NK细胞来源，然而由于脐带血NK细胞并未完全分化，杀伤力有限，有致瘤性风险。二、CAR结构设计 NK细胞上表达的功能性CAR分子与CAR-T大致相同，由三部分组成：胞外结构域、跨膜区以及胞内的信号结构域。胞外结构域由一个信号肽和识别抗原的单链抗体...
二、CAR结构设计 NK细胞上表达的功能性CAR分子与CAR-T大致相同,由三部分组成:胞外结构域、跨膜区以及胞内的信号结构域。胞外结构域由一个信号肽和识别抗原的单链抗体片段(scFv)组成,一段铰链区将这个结构连接到跨膜区,它也在细胞内连接到包含激活信号的胞内结构域。