NK细胞（natural killer cell，自然杀伤细胞）不同于T、B细胞，是一类无需预先致敏就能非特异性杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞的淋巴细胞。NK细胞是人体抗击癌细胞和病毒的第一道防线，主要分布在人体的血液、肝、脾、骨髓等部位，它具有细胞毒性效应，能自发杀伤肿瘤细胞和病原体，并参与机体的抗肿瘤免疫监视和免疫应答。
2018年6月18日,来自加利福尼亚大学圣地亚哥医学院(UCSD)和明尼苏达大学的研究人员在《Cell Stem Cell》发表了研究报告,他们研究出的一种名为NK-CAR-iPSC-NK细胞,可以说是物美价廉,不仅能有效地击退卵巢癌,同时还不会产生与CAR-T类...
只有三个构建体导致细胞溶解反应增加,选择包含 NKG2D TM 结构域和2B4共刺激结构域的构建体在iNK细胞中进行进一步分析。 NK-92细胞中作为共刺激结构域的2B4与4-1BB的另一个比较有利于含有2B4的CAR构建体,其能够诱导细胞快速增殖,增加细胞因子产生和脱颗粒,并...
car-nk细胞构建流程 1.确定目标基因:通过文献研究或基因组测序技术,选取感兴趣的基因作为目标。 2.设计引物:根据目标基因的序列设计合适的引物,通常需要设计两对引物,分别用于扩增目标基因的两段特定区域。 3. PCR扩增:使用设计的引物进行PCR扩增,得到目标基因的DNA片段。 4.克隆目标基因:将PCR扩增得到的目标基因...
嵌合抗原受体(CAR)修饰的NK(CAR-NK)细胞是下一代癌症免疫治疗的候选方案。本研究通过狒狒包膜假型慢病毒载体(BaEV-LV)转导脐带血来源的NK细胞,构建了含4-1BB和CD3ζ信号内结构域的CD19特异性CAR-NK细胞(CD19-BBz CAR-NK),并在雌性小鼠的临床前B细胞淋巴瘤模型中验证其抗肿瘤活性。随后,我们在8例复发/难治...
CAR构建体的探索之路 NK细胞上表达的功能性CAR分子包括:胞外结构域、跨膜区以及胞内的信号结构域(CD3ζ 链)。胞外结构域由一个信号肽和识别抗原的单链抗体片段(scFv)组成,一个胞外铰链区将这个结构连接到跨膜区,它也在细胞内连接到包含激活信号的胞内结构域。成功的CAR设计是通过仔细的设计和功能测试相结合来...
第一代CAR-NK细胞与CAR-T细胞一样,只含有CD3ζ信号。第二代和第三代CAR-NK分别携带一个和两个额外的共刺激信号,共刺激分子通常来源于CD28家族(CD28和ICOS)、TNFR家族(4-1BB、OX40和CD27)或SLAM相关受体家族(2B4)。到目前为止,唯一公布的CAR-NK临床试验采用了第二代CAR-NK构建,该构建通过加入IL-15表达和诱...
目前,虽然大多数CAR-NK研究没有提供连接细节,但已有的研究报道中,有22项使用了G4S连接,有2项应用了218连接。 铰链区 铰链区是连接单链抗体单位和跨膜结构域的CAR细胞外结构区,它通常维持效应细胞中稳健的CAR表达和活性所需的稳定性。大多数CAR-NK构建使用CD8α或CD28胞外结构域的衍生物或基于IgG的铰链区。 铰...
CAR-NK就是利用基因工程给NK细胞加入一个能识别肿瘤细胞,并且同时激活NK细胞杀死肿瘤细胞的嵌合抗体。嵌合抗原受体能显著提高NK细胞疗效特异性。这个思路和CAR-T的构建类似:CAR包括胞外的识别结构域(如scFv)识别肿瘤特异性抗原;一个跨膜结构域,和一个胞内信号结构域(CD3ζ 链)可以诱导NK细胞的活化。
与CAR-T细胞疗法类似,CAR-NK细胞疗法在临床前和临床试验中展现出巨大的潜力,能有效杀灭血液肿瘤和实体瘤细胞。为了确保CAR-NK细胞产品的安全性和高效性,需要建立一系列严格的质量控制检测。CAR-NK细胞作为一种“活的”药物,其制备过程非常复杂,质量控制包括安全性、纯度、效力以及均一性四个方面,贯穿CAR-NK从研发到...