3.在进行碘化丙啶(PI)操作时务必注意防护措施。如果碰到皮肤,应立即用自来水进行冲洗。4.初次使用Calcein-AM溶液和PI溶液时,建议对原液进行分装,以降低反复冻融的频率。5.由于 Calcein-AM 的稳定性较差,所以此染色工作液必须现配现用,以免影响实验的进行。#广州华韵生物科技有限公司# ...
保存建议:Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒保存:-20℃干燥避光 有效期一年。Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒常见问题:1、 该试剂盒适用任何细胞类型?基本上适用于任何含酯酶活性的动物细胞。植物和细菌细胞因含有细胞壁,Calcein-AM不能进入因此无法染色。有可能对原生质体进行染色。2、 用相同浓...
注意:由于Calcein-AM的稳定性比较差,此染色工作液必须现配现用,并且在当天用完。 1. 染色步骤 2.1 对于贴壁细胞,先用细胞刮刀或者胰酶-EDTA消化细胞,之后离心收集细胞(1000rpm,3min)。对于悬浮细胞,直接离心(1000rpm,3min)收集细胞。2.2 去上清,用1×Assay Buffer充分清洗细胞2~3次,以充分去除...
接着用该浓度的Calcein-AM对活细胞染色以检验活细胞可否被染色。 III.注意事项 1)Calcein-AM的ester部位遇到湿气会分解,使用后请在-20℃下密闭冷冻保存,防止水分进入。Calcein-AM储备液用缓冲液或培养基等稀释时尽量现配现用。 2) PI溶液在冷冻的条件下可以保存一年。PI有致癌的可能性,请在使用时注意以下3点。
注意:由于 Calcein-AM 的稳定性比较差,此染色工作液必须现配现用,并且在当天用完。2. 细胞染色 1) 染色 HeLa 细胞等贴壁细胞时,先用 Trypsin-EDTA 等消化细胞,制备成细胞悬液。2) 将细胞悬液离心 3 分钟 (1,000 rpm)。3) 去除上清液,加入 PBS 缓冲液,细胞数量调整至 1×105-1×106个/ml。再用...
Calcein AM与PI结合使用,可分别对活细胞和死细胞进行染色,实现活细胞与死细胞的联合荧光染色。在不同培养基上培养3天后,通过共聚焦激光扫描显微镜,可以看到Calcein AM(绿色)和碘化丙啶(红色和黄色)染色的肝细胞。Calcein AM的光谱特性使其成为细胞荧光标记的理想选择,不仅具有低细胞毒性,且与标准...
产品包括Calcein-AM和PI试剂,以及反应缓冲液等。Calcein-AM和PI需避光干燥保存,Calcein-AM溶液需现配现用。使用方法包括配制反应缓冲液和染色工作液,对细胞进行处理,然后在荧光显微镜下观察。操作注意事项包括Calcein-AM对湿度敏感,需密封保存;碘化丙啶(PI)有致癌性,操作时需注意防护;EDTA和酚红对...
【注】: Calcein-AM溶液和EthD-I溶液分开进行染色,先用Calcein-AM染色,再用EthD-I染色。 有时候可添加一定量的非离子表面活性剂如Pluronic F127到Calcein AM内来增强其水溶性。制备染色工作液前,取一管需要用的Calcein AM内加入20% Pluronic F127,使Pluronic F127的终浓度为0.02%。 含Pluronic F127的...
Calcein-AM/PI 染色步骤1、 用Trypsin-EDTA消化细胞。2、 通过离心收集细胞(1,000 rpm,3 min)。3、 去除上清液,加入PBS(-)制备细胞悬液(105 - 106 cells/ml为宜)。4、 重复步骤2和步骤3数次以消除培养基中的酯酶活性。5、 取100 μl 染色工作液与200 μl 细胞悬液混合,在37℃培养15 min。6...