Caco-2细胞渗透性实验是一种常用的药物吸收研究方法。Caco-2细胞来源于人结肠癌细胞,具有与小肠上皮细胞相似的结构和功能,能够模拟药物在人体小肠中的吸收过程。在实验开始前,首先需要准备好Caco-2细胞、培养基、药物溶液以及渗透性测定装置等实验器材。接着,将Caco-2细胞接种于渗透性测定装置中,并加入适量的培养...
Caco-2 细胞来源于人体结直肠腺癌细胞,是一种多克隆的连续细胞系,在体 外特定的培养条件下,Caco-2 发育分化并极化,从而形成与小肠上皮细胞相似的表 型、形态与功能(Pinto et al 1983,Hidalgo et al 1989)。…
1. Caco-2细胞模型人结直肠腺癌细胞Caco-2细胞肠渗透性模型是一个典型的体外药物吸收模型,研究表明口服药物的吸收性与其在Caco-2细胞模型的通透系数具有良好的相关性。通过药物在模型上的作用,得到药物表观渗透系数(Papp),回收率,以及药物是否为P-gp转运蛋白的底物或抑制剂等信息。2. MDCK/MDR1细胞...
Caco-2细胞(人类结肠腺癌)单层培养是一个公认的行业标准的体外模型,用于预测药物通过肠屏障的渗透性1。药物渗透性在临床前药物研究中确定,是开发新疗法时的一个重要参数,因为它对达到系统循环的口服药物的量有影响。标准Caco-2模型由接种在静态培养皿中的多孔Transwell膜上的单层细胞组成,该膜将两个流体腔室(顶部和...
Caco-2细胞,来源于人体结直肠腺癌细胞的多克隆连续细胞系,能在特定培养条件下发育分化并极化,形成与小肠上皮细胞相似的表型、形态与功能。这一模型在制药行业和学术界被广泛应用于评估化合物的渗透性和转运特性。Caco-2细胞在聚碳酸酯膜上培养21天后可自发分化为小肠微绒毛上皮细胞,并能稳定表达小肠中...
为了提升模型的生理逼真度,研究中采用禁食状态下的人肠液(Fassif)作为供体侧,接收侧则使用含有1%牛血清白蛋白(BSA)的缓冲液,这样的设定有助于模拟小肠的正常环境,同时减少药物在膜表面的非特异性吸收(13–15)。实验结果显示出,Caco-2细胞单层模型的表观渗透系数与人体实际吸收系数之间有显著的...
以下是构建Caco-2单层细胞渗透转运模型的详细实验方案: 1. 实验准备 细胞准备: 细胞系:获取Caco-2细胞株。 培养基:使用适合的培养基,如Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 添加10%胎牛血清(FBS)和1%抗生素 培养器具:无菌的培养瓶、细胞培养板(通常为Transwell® 24孔板)。
4、改模型有较广泛的适用性(可用于原料药、制剂、大小分子的跨肠膜研究) 5、Caco-2细胞内有药物代谢酶,可在有代谢状况下测定药物的跨膜转运。 6、可用于区分肠腔内不同吸收途径的差别。 7、培养成都的Caco-2细胞是致密的单层细胞,具有与正常的小肠上皮细胞相同的极性,可以从不同方向进行摄取和转运渗透实验,可...
Caco-2 细胞转运实验 ⼈结肠癌细胞系Caco-2是⽤来研究药物经肠吸收的常⽤模型。Caco-2细胞体外培养条件下可⾃发进⾏上⽪样分化,形成与⼩肠上⽪细胞相同的微绒⽑结构和紧密连接,形态学、标志酶的功能表达及渗透特征都与⼩肠柱状上⽪细胞很相似。在Caco-2细胞中,主要药物转运体如寡肽转运体...
Caco-2细胞模型建立大致步骤: 1、细胞的培养及接种铺板 2、检测电阻 Caco-2细胞培养21天,检测电阻。 3、通透性实验 首先弃去Transwell小室内外培养液,用37℃ Hanks液(PH=7.4)轻柔地清洗细胞表面3次以除去表面的杂质,然后加入37℃ Hanks液,置于37℃孵箱中孵育30分钟。吸去缓冲溶液,在AP侧(内孔)加入Xml含有受试...