BSP克隆测序法(BisulfiteSequencingPCR,BSP) BSP实验原理: BSP克隆测序法,是目前甲基化检测的金标准。用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后再CpG岛两端设计引物进行PCR,将目的产物纯化后进行TA克隆,每个克隆挑取阳性克隆测序,最后将测得的序列与原始序列比对...
目前，基因的甲基化研究主要结合亚硫酸氢钠处理和PCR技术，分为甲基化特异性PCR（MSP）和硫化测序PCR（BSP）。亚硫酸氢钠处理DNA后，DNA双链中的“C”转化为“U”，随后的PCR中，“U”转化为“T”，但亚硫酸氢盐不能使已发生了甲基化的DNA的“C”发生这种转化。因此，根据经亚硫酸氢盐处理的DNA...
因为BSP的引物设计太难了,所以我想先把目的基因给扩出来,然后再进行亚硫酸氢盐处理,就是把正常的顺序给反过来,不知道会产生什么结果? 相关知识点: 试题来源: 解析 PCR的时候甲基化C和非甲基化的C无差别的被扩增为非甲基化的C,再做下去就没意义了.结果一 题目 亚硫酸氢盐测序PCR(BSP)时,一定要用基因组DNA吗...
基因组DNA经亚硫酸盐处理后,设计BSP引物扩增目的片段,此时尿嘧啶(U)全部转化为胸腺嘧啶(T),最后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化。 BSP实验流程: DNA抽提和亚硫酸盐处理都可参考相应的试剂盒进行操作 引物设计网站网址如下:http://www...
2.BSP：甲基化的胞嘧啶在亚硫酸氢钠发生脱氨基后不会转变，用一对特异性引物扩增后测序，再与DNA原始...
成骨特异性基质蛋白主要包括碱性磷酸酶(ALP)、骨唾液蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、I型胶原(COL I)。成骨细胞表型是分两个阶段特异性获得的。在第一阶段,细胞增殖并且基质成熟。与骨细胞表型有关的特定蛋白质,例如在第10到15天的细胞增殖和基质成熟过程中检测到碱性磷酸酶(ALP)。在第二阶段基质矿...
bsp甲基化扩增得到的pcr产物可否直接测序,为什么需要构建ta克隆后测序960化工网专业团队、用户为您解答,有bsp甲基化扩增得到的pcr产物可否直接测序,为什么需要构建ta克隆后测序的疑问
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NMSP（巢氏MSP）中的第一轮PCR引物是否和BSP引物 原理是一样？ 如原理一样，我用NMSP第一轮PCR...
bsp DNA甲基化 BSP甲基化位点检测,pcr结果,失败!!求大佬pcr体系和程序,原因?? [图片]显示全部 关注者1 被浏览5 关注问题写回答 邀请回答 好问题 添加评论 分享 暂时还没有回答,开始写第一个回答下载知乎客户端 与世界分享知识、经验和见解...