BMP-2真核表达质粒转染入BMSCs,荧光显微镜下观察绿色荧光,计算转染率,利用ELLISA法检测目的基因在靶细胞中的表达,免疫组化染色检测成骨特异性生化指标(I型胶原,及骨钙素).结果本实验成功的利用脂质体将质粒转染人BMSCs,目的基因可以持续高表达,并促进细胞向成骨方向分化.结论为进一步利用BMP-2基因修饰组强I程骨...
,WB等检验表明质粒构建成功并具有转录活性.结论:本实验成功构建了具有表达活性的hBMP一2真核表达质粒,为进一步研究用BMP一2基因转染的方法来促进实验动物骨折的愈合奠定了基础.关键词:人类;pIRES2一EGFP;骨形成蛋白2;基因中图分类号:R34文献标识码:A文章编号:1009—5551(2008)05—0524—04ConstructionoftheplRES2?
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pLenti-BMP2-sgRNA (BMP2基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因,或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
GFP示踪FLAG抗原表位标记BMP2转基因腺病毒穿梭质粒的构建
pIRES2-EGFP-BMP-2真核表达质粒的构建及其活性测定 维普资讯 http://www.cqvip.com
目的构建腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1,为构建表达具有抗原表位标记的骨形态发生蛋白2(bone morpbogenetic protein 2,BMP-2),并同时表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)报告分子的腺病毒真核细胞表达载体打下基础.方法对目的基因供体质粒pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因测序和序列内部存...
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【摘要】目的:构建pIRES2-绿色荧光蛋白(EGFP)-骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)真核表达质粒,并检测其表达活性.方法:采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从人骨肉瘤组织中扩增出人骨形态发生蛋白2 (hBMP-2)的基因片段,构建成pIRES2-EGFP-BMP-2重组质粒,经酶切、测序检测其构建的正确性,通...
目的构建腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1,为构建表达具有抗原表位标记的骨形态发生蛋白2(bone morpbogenetic protein 2,BMP-2),并同时表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)报告分子的腺病毒真核细胞表达载体打下基础.方法对目的基因供体质粒pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因测序和序列内部存在的...