🔟 培养1天后,将悬浮细胞液吸取至non-treated培养皿中。 1️⃣1️⃣ 培养第4天更换新鲜培养基,培养基为DMEM+10% FBS+1% 双抗+ 100 ng/mL M-CSF1(建议M-CSF1浓度在50-100 ng/mL)。 1️⃣2️⃣ 培养第7天获得成熟的BMDM,用刮刀刮下细胞(胰酶消化较慢,不推荐),用
bmdm提取步骤bmdm提取步骤 BMDM(Bone Marrow-Derived Macrophages,骨髓来源巨噬细胞)提取步骤如下: 准备小鼠:选用8~10周龄雄性C57BL/6小鼠,脱颈处死后,剔除腿部肌肉及骨盆和股骨的剩余软组织,剪开腿骨两端。 收集骨髓细胞:将小鼠的胫骨和股骨放入含有预热至37℃的DMEM培养基(含10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素)的离心...
无论是用无菌的巧手或借助巧具(镊子/剪刀),尽量将附着在骨头上的肌肉与韧带去除,同时不能将骨头折断哦!2与3两步,无论是先离断成两部分(分离的股骨与胫骨)或一个接一个的处理都是可以的哦,主要看你习惯哪种方式保持股胫骨的快速和完整取出。 这样我们就得到了活度较好的BMDM细胞啦,可进行后续的培养和干预,你...
BMDM小鼠骨髓源性细胞提取 取一只ICR雌性小鼠,颈椎脱臼处死,在75% 乙醇里浸泡5分钟。准备10 ml 10% 1640培养基,20 ml左右PBS(装在50 ml ep管里),10左右PBS(装在10 cm中皿里)。1 ml注射器一只,灭过菌的手术器械一副(一把剪刀,一把镊子)。 将在乙醇里浸泡过的小鼠置于超净台上(铺一些纸),剪下小鼠的...
原代骨髓来源的巨噬细胞BMDM提取与诱导 小鼠骨髓来源的巨噬细胞（Bone marrow-derived macrophages, BMDM）。它最大的优点在于它是原代细胞，其性状和功能更贴近与小鼠机体本身的巨噬细胞，被广大研究人员充分肯定并接受。其次每次试验先用现提，避免了实验室祖传细胞株培养变异的情况，试验结果稳定可靠。实验所需的动物...
🧬 培养细胞:加入完全培养基和10ng/ml的M-CSF(peprotech),根据细胞贴壁情况调整培养时间,一般3-5天完全贴壁。如果贴壁慢的话,可以用2倍浓度的M-CSF。📅 铺板与换液:7天左右可以用胰酶消化或巴氏吸管刮下细胞铺板。个人习惯使用1640培基和ubi的血清,每3天全换液一次,一般不传代。以上是BMDM提取及诱导巨噬...
冲洗骨髓:将骨髓冲洗到细胞培养皿中,配好的DMEM(细胞培养处理,直径10厘米),每根骨头缓慢注射约2-3毫升DMEM,直至骨髓腔变白。确保DMEM不回流,以避免污染。培养基为DMEM+10%FBS+1%双抗+100 ng/mL M-CSF。🧪 提取骨髓巨噬细胞BMDM需要一定的技巧和耐心,但通过以上步骤,你可以成功获得大量的BMDM细胞,用于科研实...
从小鼠骨髓中提取BMDM细胞，过夜后提取上清液，铺于大皿中一开始细胞挺多的，加入生长因子后，贴壁细胞也...
Isolation of bone marrow and generation of BMDMФ Day 0: Before getting mice: -- Add~3 mL EtOH to a small petri dish and set on ice -- Place 10mL complete DMEM in a 15 mL conical and place on ice -- Soak dissection tools in EtOH 1. Sacrifice mice; 2. Remove leg bones ( femur...
前几次提的细胞是红细胞很多，但是上清细胞也很多，但是这几次是没有红细胞杂质，但是上清液也没细胞，...