首先，获取小鼠的骨髓细胞。通常从小鼠的股骨和胫骨中抽取骨髓。在无菌条件下，小心地分离小鼠的股骨和胫骨，去除周围的肌肉组织，用无菌的注射器吸取适量的培养基冲洗骨髓腔，收集骨髓细胞悬液。将收集到的骨髓细胞接种到培养瓶或培养板中，加入含有特定细胞因子的培养基。一般来说，常用的细胞因子是巨噬细胞集落刺激因子（
BMDM小鼠骨髓源性细胞培养 提取完成的单核细胞在10cm中皿培养过夜(提取步骤在前面),第二天早上需要将细胞铺于6孔板或者12孔板。一般来说,一只小鼠的腿骨细胞可以铺四块6孔板或者六块12孔板。首先解冻一管L929细胞(L929细胞的培养在之前也有讲过),大约10 ml左右。解冻期间拿出昨天提取的小鼠单核细胞,收集上清,1700...
BMDM小鼠骨髓源性细胞提取 取一只ICR雌性小鼠,颈椎脱臼处死,在75% 乙醇里浸泡5分钟。准备10 ml 10% 1640培养基,20 ml左右PBS(装在50 ml ep管里),10左右PBS(装在10 cm中皿里)。1 ml注射器一只,灭过菌的手术器械一副(一把剪刀,一把镊子)。 将在乙醇里浸泡过的小鼠置于超净台上(铺一些纸),剪下小鼠的...
BMDM小鼠骨髓源性原代细胞培养是生物实验中的一项关键步骤，其过程需细心且精确。首先，提取的单核细胞在10cm培养皿中过夜培养。第二天，这些细胞将被铺展至6孔板或12孔板上。一只小鼠的骨髓细胞通常能够覆盖四块6孔板或六块12孔板。接着，从冻存的L929细胞中取出，大约10ml。同时，收集并离心提取的小鼠...
提取BMDM小鼠骨髓源性细胞，需选用ICR雌性小鼠，确保无菌环境。首先，将小鼠浸泡于75%乙醇中5分钟。准备10 ml 10% 1640培养基，20 ml左右PBS（盛于50 ml ep管中），10 ml左右PBS（盛于10 cm中皿中）。使用灭菌手术器械，剪下小鼠大腿和小腿的股骨和胫骨，剔除肉质部分，浸泡于中皿PBS中。小心剪开...
1、BMDM巨噬细胞置于 6 孔板中; 2、密度为 2.5 × 105细胞; 3、细胞转染密度为 70%; 4、10 µL siRNA (100 pmol/mL) 和10ul转染试剂室温混合恒温 15 分钟; 5、然后加入含有 1ml 的正常 DMEM培养基到 6 孔板; 6、24 小时后换成新鲜 DMEM培养基继续培养; ...
我们实验室诱导BMDM是这样诱导的：1、引颈处死小鼠，将小鼠后肢的皮毛剥置足部，连同褪下的皮毛剪去足部...
下面我将从多个角度介绍BMDMS的培养方法。 1. 材料准备。 常用培养基包括DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)或RPMI 1640培养基,其中含有10%胎牛血清(FBS)或去血清培养基,还有抗生素如青霉素/链霉素。 2. 培养骨髓细胞。 首先需要从小鼠或大鼠的骨髓中分离细胞。通常使用灭菌的方式,将小鼠或大鼠的胫骨和腓骨...
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评价:在原代巨噬细胞的获取中,直接分离的腹腔巨噬细胞或者肺泡巨噬细胞数量有限,在未经诱导时,每只小鼠只能获取1.5-3×106个腹腔巨噬细胞,不能满足某些实验的需求,因此骨髓诱导分化的巨噬细胞(BMDM)依旧是目前实验室最常用的分离小鼠巨噬细胞的选择。目前BMDM获取的最主要的方式有两种:一是利用重组的M-GSF诱导小鼠...