冲洗时在50mL离心管上放上过滤筛,过滤筛先用PBS浸润一下。 步骤二:提取细胞 过滤液体离心:将过滤后的液体离心(1000rpm、5min)。离心后的液体去掉上清,加入裂红液(没有规定的量,我一般加3-5mL),重悬,静置3min(上清去不干净影响裂红效果)。 再次离心:静置后离心(1000rpm,4min),去上清,用PBS反复冲洗至上清无...
1️⃣1️⃣ 培养第4天更换新鲜培养基,培养基为DMEM+10% FBS+1% 双抗+ 100 ng/mL M-CSF1(建议M-CSF1浓度在50-100 ng/mL)。 1️⃣2️⃣ 培养第7天获得成熟的BMDM,用刮刀刮下细胞(胰酶消化较慢,不推荐),用于后续实验。💡小贴士: 1️⃣ 该方法无需进行裂红处理,培养一天后去除贴壁...
bmdm提取步骤bmdm提取步骤 BMDM(Bone Marrow-Derived Macrophages,骨髓来源巨噬细胞)提取步骤如下: 准备小鼠:选用8~10周龄雄性C57BL/6小鼠,脱颈处死后,剔除腿部肌肉及骨盆和股骨的剩余软组织,剪开腿骨两端。 收集骨髓细胞:将小鼠的胫骨和股骨放入含有预热至37℃的DMEM培养基(含10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素)的离心...
原代骨髓来源的巨噬细胞BMDM提取与诱导 小鼠骨髓来源的巨噬细胞（Bone marrow-derived macrophages, BMDM）。它最大的优点在于它是原代细胞，其性状和功能更贴近与小鼠机体本身的巨噬细胞，被广大研究人员充分肯定并接受。其次每次试验先用现提，避免了实验室祖传细胞株培养变异的情况，试验结果稳定可靠。实验所需的动物...
BMDM小鼠骨髓源性细胞提取 取一只ICR雌性小鼠,颈椎脱臼处死,在75% 乙醇里浸泡5分钟。准备10 ml 10% 1640培养基,20 ml左右PBS(装在50 ml ep管里),10左右PBS(装在10 cm中皿里)。1 ml注射器一只,灭过菌的手术器械一副(一把剪刀,一把镊子)。 将在乙醇里浸泡过的小鼠置于超净台上(铺一些纸),剪下小鼠的...
🐭 注意:8-14周大的小鼠都可以用来提取BMDM。一只小鼠的BMDM可以铺满一个10厘米的培养皿。如果你想要获得尽可能多的BMDM,可以考虑提取两只小鼠的前腿骨髓。🔪 步骤如下: 小鼠处理:首先,用足量的75%乙醇对小鼠进行喷洒消毒,或者将其浸泡消毒。 剪断腿部:用手术刀沿着小鼠大腿根部的髋关节处将整条腿拆下,注意...
将骨骼放入75%乙醇中消毒,但不要过久以免影响细胞活性。🔪 剔除肌肉:在盛有PBS或培养基的培养皿中剔除肌肉,然后将骨骼放入新的培养基中。如果肌肉剃不干净,可以用纱布摩擦擦下肌肉。🧼 消毒工具:在细胞房超净台中操作,准备镊子、眼科剪、酒精棉球、离心管、培养皿和T75细胞培养瓶。剪刀和镊子每次使用后要用...
•背景介绍•L929培养•BMDM提取、诱导与培养•问题解决 Hematopoiesis YolkSac(卵黄囊)FetalLiver Wikipedia VirginieTrouplin,etal.JOVE,2013.L929培养 •Organism:Musmusculus,mouse•Morphology:fibroblast•Medium:completeDMEM(10% FBS)•Subculturing:2XTE,1min L929培养 •100mmdish,10million •ten...
从小鼠骨髓中提取BMDM细胞，过夜后提取上清液，铺于大皿中一开始细胞挺多的，加入生长因子后，贴壁细胞也...
Isolation of bone marrow and generation of BMDMФ Day 0: Before getting mice: -- Add~3 mL EtOH to a small petri dish and set on ice -- Place 10mL complete DMEM in a 15 mL conical and place on ice -- Soak dissection tools in EtOH 1. Sacrifice mice; 2. Remove leg bones ( femur...