T7 RNA聚合酶表达:BL21(DE3)pLysS菌株在lacUV5启动子控制下可表达噬菌体T 7 RNA聚合酶,相关基因序列已经整合到细菌染色体中。IPTG可以诱导BL21(DE3) 菌株中T7 RNA聚合酶的高表达,适合T7启动子驱动的重组蛋白诱导表达系统,如 常见的原核表达载体pET系列。 适合表达蛋白:由于pLysS质粒的存在,BL21(DE3)pLysS菌株特别...
最终结果显示诱导表达4 h,以出发菌株E. coli BL21( DE3)为宿主时,β-呋喃果糖苷酶β-HFFase 的胞外分泌量占总表达量的2.6%,以敲除菌株△msbB为宿主时﹐胞外分泌量达到19.7% ,而以敲除菌株△uwaaF为宿主时,胞外分泌量达到50.9%。另外,当诱导表达24 h,以敲除菌株△wuaaF为宿主时,青霉素G酰化酶PCA的胞外酶...
BL21(DE3)是BL21被λ噬菌体DE3溶原化的衍生菌株,在lacUV5启动子控制下可表达噬菌体T7 RNA聚合酶(相关基因序列已经整合到细菌染色体中)。IPTG可以诱导BL21(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的高表达,因此BL21(DE3)菌株适合受T7启动子调控的目的基因通过IPTG诱导表达。常见的pET系列原核表达载体中目的基因的表达都是受T7启动...
为了研究HTS1菌株和HTS2菌株表型不同 的原因, 对其携带的质粒进行了如下分析:( 1) 将 HTS1菌株和 HTS2 菌株中表达质粒分别提取出来, 转化入新鲜制备的BL21(DE3) 感受态细胞, 结果发现两类菌株的生长和重组蛋白表达情况回复到原始菌株水平, 蛋白表达水平均在18%~ 20%。( 2) 将HTS1菌株和HTS2菌株的质粒相关...
🔬 DH5α和BL21是两种常用的大肠杆菌(E. coli)菌株,它们各自具有独特的特点,主要区别体现在以下几个方面:1️⃣ 适用领域:DH5α适合进行基因克隆和DNA重组等研究,如质粒构建和PCR克隆。而BL21则更适合进行蛋白表达。2️⃣ 生长速度:DH5α的生长速度相对较慢,而BL21的生长速度则较快。3...
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BL21（AI）BL21(AI)来源于BL21菌株，为Lon蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株，这两种酶的缺失有效防止异源蛋白在大肠杆菌体内的降解。在培养基中添加L-阿拉伯糖可诱导araBAD启动子下游T7RNA聚合酶的表达进而促进目的蛋白的表达。在培养基中添加葡萄糖可抑制araBAD启动子下游T7RNA聚合酶的表达进而抑制目的蛋白的表达...
在使用BL21菌株表达蛋白时,通常会等菌株的生长达到0.4-0.8 OD600再添加IPTG进行诱导,这个做法主要有以下几个原因: 提高蛋白表达的效率 当细菌处于对数生长期(log phase),它们的代谢活跃,细胞分裂速度较快。…
当BL21(DE3)菌株被加入IPTG等诱导剂后,T7 RNA聚合酶被诱导表达。这个T7 RNA聚合酶可以结合到目标蛋白基因的T7启动子上,进而促进目标蛋白基因的表达。 此外,BL21(DE3)菌株还有一些特点,如缺失细胞质中的Lon蛋白酶和胞外膜上的OmpT蛋白酶,这样可以有效避免重组表达蛋白的降解,因此被广泛用作外源蛋白的表达菌株。...
BL21(AI)是大肠杆菌B/r型菌株(E.coli B/r)。BL21(AI) 来源于BL21菌株,为Lon蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株,这两种酶的缺失有效防止异源蛋白在大肠杆菌体内的降解。在培养基中添加L-阿拉伯糖可诱导araBAD启动子下游T7RNA聚合酶的表达进而促进目的蛋白的表达。在培养基中添加葡萄糖可抑制araBAD启动子下游T...