双分子荧光互补(BIFC)、免疫共沉淀(Co-IP)、酵母杂交(YIH/Y2H)、GST pull-down、ChIP、RIP、EMSA和荧光素酶蛋白互补实验(LCA)等十余种前沿互作技术,无论是在医学研究、新药开发,还是农业科学、作物改良等领域,均能提供个性化研究方案,助力加速项目进程。
BiFC在沿袭蛋白质互补技术的基础上进行了优化,蛋白质互补技术中功能蛋白的活性由底物反应所体现,通过检测底物变化,来判断蛋白质的相互作用,例如:荧光素酶互补实验(Split-LUC);而BiFC技术则是利用荧光蛋白本身能够自我催化形成荧光活性中心并产生荧光蛋白的特征光谱的特点,直接反映蛋白质之间的相互作用,技术过程更加简单,结...
BIFC原理 在荧光蛋白(YFP、GFP、Luciferase等)的两个β片层间的环结构上有许多特异性位点可以插入外源蛋白而不影响荧光蛋白的荧光活性。BIFC技术正是利用荧光蛋白家族的这一特性,将荧光蛋白分割成两个不具有荧光活性的分子片段,再分别与目标蛋白融合表达。如果两个目标蛋白因物理相互作用而靠近,就使得荧光蛋白的两个分...
🔬 双分子荧光互补(BIFC)技术是一种直观、快速检测蛋白质在细胞内相互作用的方法。它利用荧光蛋白的两个片段在特定条件下重新组装并发光,从而揭示蛋白质之间的相互作用。BIFC实验的关键在于构建含有荧光蛋白片段的载体,这些片段在正常情况下不会自发结合,而是需要借助与之融合的蛋白质之间的相互作用来接近并形成完整的...
BiFC,bimolecular fluorescence complementation,双分子荧光互补技术,是一种快捷、直观地判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术。BIFC巧妙地将荧光蛋白分子的两个互补片段分别与目标蛋白进行融合表达,如果荧光蛋白活性恢复则表明两个目标蛋白发生了相互作用。
双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)分析技术,是由Hu等在2002年最先报道的一种直观、快速地判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术。简介 将荧光蛋白在某些特定的位点切开,形成不发荧光的N和C端2个多肽,称为N片段(N-fragment)和C片段(C-fragment)。这2个片段在细胞内共表达或...
小编今天介绍的是用的不多的双分子荧光互补( bimolecular fluorescence complementation, BiFC)实验,但是大家都挺感兴趣的的。双分子荧光互补(BiFC)是一种可视化活细胞中蛋白质-蛋白质相互作用和定位的技术,已经被广泛应用于各种模式生物中。 网上有很多帖子也讲了这个实验,但是大部分都是到处抄来拼接到一起,骗粉丝流量...
双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation, BiFC)分析技术,是由Hu等在2002年最先报道的一种直观、快速地判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术。 该方法利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)及其突变体的特性作为报告基因,将荧光蛋白分割成两个不具有荧光活性的分子片段,再分别与目标...
1、适用于体内和体外蛋白相互作用的验证;2、实验中的蛋白处于天然状态,并能直观观察蛋白相互作用在细胞中的定位;3、实验周期短;4、相对于FRET和BRET技术对仪器的要求高、数据处理复杂的情况,BiFC只需要荧光倒置显微镜,数据处理简单,只检测荧光的有无,背景干净,检测更灵敏,不依赖于其他次级效应;5、还可以用于...