当实验检测不到条带的时候,我们可以用Jurkat细胞裂解液作为BCL-2的阳性对照或者通过CST申请相应的阳性对照。 3.抗体的选择 关于抗体的选择,我们之前写过相关的文章,大家可以参考( 结语 天底下有太多的道理,每个人对道理的理解和领悟不一样而导致实践千差万别,因此人生结局各有不同;而我们做WB,不同的蛋白表达丰度...
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定量Western印迹(WB)的条带强度。使用Bioconductorpackage(www.bioconductor.org)的GeneSpringnormalizationoption和GlobalMediannormalization使表达数据以中位数为中心不存在任何本质差异。实施例6:microRNAs,/g^KJa和/p^-Jf-7的表达减少了转染的MEG-01细胞中的BCL2蛋白的表达为调查表达包含边"^^a/历/A-^^-J的完全...
(1) Bax和Bcl-2是相互对立的一对靶点,当两者条带趋势不一致时,我们可以通过其与内参的比值来判断,当Bax水平的升高和Bcl-2的降低表明细胞可能发生了凋亡; 图3 WB结果示例 (2)若结果显示Bax与Bcl-2的蛋白表达变化一致时,如图4,也不必苦恼结果无法分析,因为某些细胞因子或细胞应激信号会导致同时上调或下调这两种...
其中,Wa和Wb是化学反应后形成如上限定的基团W的化学基团。 Wa和Wb是本领域技术人员公知的,并且分别为例如-F或-Cl和-NH 2 ,-F或-Cl和-NH 2 通过亲核芳香取代形成-NH-;或为-COOH或活化酯和-NH 2 ,-COOH或活化酯和-NH 2 通过肽偶联形成-CONH-。 D是市售的或通过本领域技术人员公知的方法获得。 在一...
的活性,其中,开发高效的bh3模拟分子是一条有希望的途径。这些分子与bcl-2家族的抗凋亡蛋白中的bh3结合槽结合,并通过释放促凋亡的bcl-2家族成员促进细胞死亡。 5.在卵巢癌中,发明者先前证明bcl-x l 和mcl-1配合保护肿瘤细胞免于凋亡,并且它们的伴随抑制会导致大量细胞凋亡,即使在没有化疗的情况下,也是如此,而bc...
做过很多次WB(Western Blot),依然做不出BCL-2…… 最近,很多同学在做BCL-2的WB 实验时,总是检测不到条带,问我是什么原因。一开始听到这个问题,我还真不知如何回答,因为原因太多了, 比如:是不是样本中该蛋白的表达不够,是不是WB 实验时转膜方法不合适,是不是抗体选择不对等等都有可能。还一些同学会问,为...