一、蛋白定量BCA(Bicinchoninic Acid)法 BCA (bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂,混合一起即成为苹果绿,即BCA工作试剂。在碱性条件下,BCA与蛋白质结合时,蛋白质将Cu2+还原为Cu+,一个Cu+螯合二个BCA分子,工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物,562nm处有zui高的吸收值,可在540-59...
BCA(二喹啉甲酸法): 二喹啉甲酸(Bicinchoninic acid,BCA )法是Lowry测定法的一种改进方法,是近来广为应用的蛋白定量方法。其原理与Lowery法蛋白定量相似,即在碱性条件下蛋白质分子中的肽键能与Cu2+络合生成络合物,同时将Cu2+还原成Cu+。二喹啉甲酸及其钠盐是一种溶于水的化合物,在碱性条件下,可以和Cu+结合形成...
一、蛋白定量BCA(Bicinchoninic Acid)法 BCA (bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂,混合一起即成为苹果绿,即BCA工作试剂。在碱性条件下,BCA与蛋白质结合时,蛋白质将Cu2+还原为Cu+,一个Cu+螯合二个BCA分子,工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物,562nm处有最高的吸收值,可在540-595...
蛋白定量BCA法,Bradford法,是2种常见的蛋白定量方法,关于这两种方法的原理,优缺点,以及操作步骤,下面将一一解析。 一、蛋白定量BCA(Bicinchoninic Acid)法 BCA (bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂,混合一起即成为苹果绿,即BCA工作试剂。在碱性条件下,BCA与蛋白质结合时,蛋白质将Cu2+...
之前给大家介绍了蛋白质定量之 、 ,今天再给大家介绍另外一种蛋白定量的方法:BCA法。 实验原理 BCA(bicinchoninic acid)是一种稳定的水溶性复合物,在碱性条件下,二价铜离子可以被蛋白质还原成一价铜离子,一价铜离子可以和BCA相互作用,两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的络合物,该复合物为水溶性,在562nm处显示...
BCA法实验原理、操作步骤 一、实验原理 BCA(bicinchoninic acid,二辛可酸)法,测定蛋白质即在碱性条件下蛋白质与Cu2+络合,并将其还原成Cu1+。Cu1+和BCA试剂反应,使其由原来的苹果绿形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nm有强烈的光吸收,且吸光值和蛋白质浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此可用于蛋白质浓度测定...
Bicinchoninic acid (BCA )法是近来广为应用的蛋白定量方法。其原理与Lowery法蛋白定量相似,即在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。BCA与 Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nM处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度。与Lowery法相比,BCA蛋白测定方法灵敏度高,操作简单...
BCA(bicinchoninic acid)法是一种常用的蛋白质浓度测定方法。该方法的原理是基于蛋白质与巴氏碱性柠檬酸铜络合物(BCA-Cu2+)反应产生紫色底物的特性。 在测定中,首先将待测蛋白溶液与BCA试剂(含有NaOH、CuSO4和BCA)混合。随后,这些试剂与蛋白质中的蛋白质络合物发生反应。在碱性条件下,氧化还原反应发生,使得BCA-Cu2+...
BCA (Bicinchoninic acid) 法是目前应用比较广泛的蛋白质浓度测定方法。基于双缩脲反应,即在碱性环境下蛋白质将Cu2+还原成Cu+,Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,在562 nm处有高的吸光值,该反应产物的量与蛋白质浓度成正比。测定其在562 nm处的吸光值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。该方法快速...
它基于蛋白质与铜离子和双吡啶卡宾酸(Bicinchoninic Acid,BCA)反应生成紫色络合物的原理。BCA法具有高灵敏度、高线性范围和较低的变异性,适用于多种样品类型。 基本原理 BCA法基于蛋白质中含有的还原性氨基酸(如半胱氨酸和组氨酸)能够还原Cu²⁺离子为Cu⁺离子的特性。在碱性条件下,Cu²⁺与BCA试剂中的双...