BCA法测蛋白浓度原理如下: 在碱性条件下,蛋白质将Cu2+还原为Cu+,Cu+与BCA试剂(4,4′-二羧酸-2,2′-二喹啉钠)生成紫色络合物,于562nm有最大吸收,其强度与蛋白质浓度成正比。此法的优点是试剂单一、终产物稳定,与lowry法比较几乎没有干扰物影响。尤其是在TritonX-100、SDS等表面活性剂中也可测定。其灵敏度...
BCA蛋白浓度检测是一个实验,是根据吸光值可以推算出蛋白浓度.碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,两分子BCA螯合一个Cu+。将该水溶性复合物在562nm处的吸收值,与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(E...
bca蛋白浓度测定方法的原理 BCA(Bicinchoninic Acid)蛋白浓度测定方法的原理基于碱性条件下蛋白质分子中的肽键能将二价铜离子(Cu²⁺)还原为一价铜离子(Cu⁺ ),后者与BCA试剂形成紫色络合物,且在一定浓度范围内,该络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,通过比色法在特定波长下测定吸光度,即可根据标准曲线计算出...
BCA测蛋白浓度的原理主要包括以下几个方面: 1. 蛋白质与BCA试剂的反应。 BCA试剂是由硫代巯基双胺(DTT)、碱性氢氧化钠、蛋白质还原剂(如硫代巯基乙酸钠)和BCA螯合剂(如双肌酮)组成的。在碱性条件下,蛋白质与BCA试剂中的铜离子结合形成紫色螯合物,螯合物的光密度与蛋白质的浓度成正比。因此,通过测定螯合物的光...
一、实验原理: BCA是一种碱性的水溶性复合物,在其提供的碱性环境下,蛋白质可以将BCA试剂中的Cu2+还原为Cu+,Cu+继而与BCA试剂螯合,从而产生蓝紫色的络合物,在562nm波长处具有强吸收峰,通过测定吸光度,结合标准曲线即可得知蛋白质浓度。 二、实验步骤(看试剂盒而定): 收集细胞并裂解,低温高速离心后取上清,记录...
手把手教学——BCA法检测蛋白浓度 一、 实验原理 BCA是一种碱性的水溶性复合物,性质稳定。在其提供的碱性环境下,蛋白质可以将BCA试剂中的Cu2+还原为Cu+,Cu+继而与BCA试剂螯合,从而产生蓝紫色的络合物,在562nm波长处具有… 实验老司机 【实验技巧】BCA 法蛋白定量 BCA 蛋白定量法是实验室常用的蛋白质定量方法。
🌈 原理: BCA蛋白浓度测定法是基于改良的Lowry法,利用二喹啉酸(bicinchoninic acid)作为反应剂。这个方法结合了双缩脲反应和显色反应:在碱性介质中,蛋白质将Cu2+还原成Cu1+,然后使用含有二喹啉甲酸(BCA)的独特试剂,通过比色法检测Cu1+,具有高灵敏度和高选择性。显色物质是由两分子的BCA和一分子的亚铜离子螯...
BCA法是一种常用的测定蛋白质浓度的方法,其原理是利用蛋白质与铜离子在碱性条件下形成紫色络合物的反应,通过比色测定紫色络合物的吸光度来计算蛋白质的浓度。 BCA法的具体操作步骤如下:首先将待测样品加入含有BCA试剂的反应液中,经过一定时间的反应后,加入止反剂停止反应。然后将反应液中的紫色络合物通过比色法测定吸...