ATPase染色(ATP酶钙钴法染色)是一种用于检测组织中ATP酶活性的组织化学染色方法,特别是在研究肌肉组织的纤维 类型时应用广泛。 以下是ATP酶钙钴法染色的详细实验步骤: 材料和试剂 冰冻组织切片(通常为肌肉组织) ATP底物溶液(含有三磷酸腺苷 [ATP]) 钙溶液(如1% CaCl?溶液) 钴溶液(如1% CoCl?溶液) 硝酸钴溶液...
ATP酶组织化学滴染法染色技术396位,可进行选择性腐蚀.腐蚀时,尽可能使该段面与腐蚀液在同一水平面,避免腐蚀液渗浸叶段间裂层面损害性腐蚀,若有发生,即可用5..
染色结果:酶所在阳性部位黑色硫化钴沉淀 阴性对照(可选) :1. 取对照切片,用试剂(F)- ATPase对照液 进行孵育,并不用ATPase孵育液 孵育的切片进行比较。两者反应相同部位可能有非特异性磷酸(单酯)酶存在,两者不同部位才是ATP酶活性所在。2. 将切片入80℃蒸馏水10min,再不其他组织切片同时孵育,结果应为阴性...
(二)、染色(所有过程除水洗外全部使用滴染法,剂量200-500μL) 1、切片在室温下,置碱性预孵育液中15min。 2、切片放入37℃的ATP酶预孵育液中45min。 3、1%氯化钙液洗涤1次,10min,15min时再补加一次1%氯化钙液(或重复三次)。 4、切片放入2%氯化钴(或氯化钙)中,3min。
肌球蛋白ATP酶染色方法因不需要专用抗体,肌纤维染色结果清晰直观,因而一直被研究者采用。GUTH和SAMAHA[1]于上世纪70年代首次系统地提出了肌球蛋白ATP酶酸碱孵育法,在孵育前分别将冰冻切片置于碱性(pH )或酸性溶液(pH )中预孵育,由于Ⅰ型纤维的ATP酶活性小、遇碱不稳定,Ⅱ型纤维ATP酶活性大、遇碱稳定,通过控制预...
虽然不知道是什么,但好似系:目的改进经典的ATP酶组织化学染色法,以用于肌纤维分型研究和肌肉疾病病理诊断。方法肌肉组织行异戊烷-液氮冷冻,冰冻切片,组织化学染色采用ATP酶微量滴染技术。结果本改良的ATP酶组织化学滴染法能清楚地显示肌纤维的类型和分布,有助于肌肉疾病的诊断。
ATP酶法冰冻切片人体肌肉组织分型染色试剂是一种旨在使用钙激活技术,在碱性或酸性条件下,由三磷酸腺苷酶催化水解产生的磷酸与钙离子结合,经过氯化钴的替换,后在硫化铵存在的情况下,呈现组织样本中酶活性部位的不同深浅棕色沉淀现象的*而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于人体组织冰冻切片...
染色结果: 酶所在阳性部位黑色硫化钴沉淀 阴性对照(可选): 1、取对照切片,用试剂(F)-ATPase对照液进行孵育,并与用ATPase孵育液孵育的切片进行比较。两者反应相同部位可能有非特异性磷酸(单酯)酶存在,两者不同部位才是ATP酶活性所在。 2、将切片入80℃蒸馏水10min,再与其他组织切片同时孵育,结果应为阴性。
三磷酸腺苷酶( adenosine triphosphatase ,ATPase)是一种水解酶,是催化ATP 合成的一种酶。ATPase 能水解三磷酸腺苷为磷酸腺苷和磷酸,此酶只作用于磷酸与磷酸之间的高能键,因而释放大量能量。ATPase 染色(钙钴法)原理在于三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷为二磷腺苷和磷酸,磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀,最终产物为...