目的建立hPARP-1蛋白缺陷细胞株,观察该缺陷所引起的生物学效应.方法用构建的hPARP-1基因反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-C1-P)转染人胚肺成纤维细胞(HLF),用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中hPARP-1基因的表达水平.同时观察转染细胞生长形态,绘制生长曲线,用流式细胞术观察细胞周期,软琼脂培养法鉴定转染细胞恶...
目的建立hPARP-1过表达的HaCaT细胞株,观察过表达该基因后所引起的生物学效应. 方法常规提取人皮肤角质细胞HaCaT的总RNA,RT-PCR扩增PARP-1全长cDNA基因片段,构建含PARP-1全长cDNA基因片段的真核表 达载体pEGFP-PARP-1,通过Sg1Ⅱ,xhoⅠ双酶切及测序鉴定其正确性.利用脂质体将pEGFP—N2和pEGFP-PARP-1分别转染人 ...