ARMS-PCR即扩增阻滞突变系统PCR(Amplification Refractory Mutation System PCR,ARMS-PCR),又称为等位基因特异性PCR(Allele-Specific PCR,AS-PCR),通过引物3’末端引物设计控制等位基因特异性延伸,并结合Taqman探针的方法检测荧光信号值,从而判断野生型等位基因和突变型野生基因。 ARMS PCR引物设计时等位基因两条上游引物...
ARMS-PCR技术的原理是利用引物的选择性扩增来检测目标序列中的突变位点。 ARMS-PCR的原理基于引物的选择性扩增。在ARMS-PCR中,通常使用两对引物,一对用于扩增野生型基因序列,另一对用于扩增突变型基因序列。这两对引物分别包含与野生型和突变型基因序列相匹配的引物。当PCR反应进行时,如果样本中存在野生型基因,只有...
它的原理基于PCR技术,通过引入额外的引物来增加PCR的特异性。在传统的PCR实验中,引物通常设计在目标序列的两侧,而Arms PCR则在目标序列的突变位点上引入额外的引物。 Arms PCR的引物可以分为两类:外部引物(outer primers)和内部引物(inner primers)。外部引物与目标序列的突变位点相邻,内部引物与目标序列的突变位点...
ARMS-PCR扩增阻滞突变系统PCR （Amplification Refractory Mutation System PCR，ARMS-PCR），又称为等位基因特异性PCR（Allele-Specific PCR，AS-PCR）是Newton等首先建立用来检测已知突变的方法。ARMS基本原理如果引物的3′端碱基与模板碱基不互补，则用一般耐热DNA聚合酶无法延伸。因此根据已知点突变设计2条引物，其3′...
ARMS-PCR的高特异性要求 从ARMS-PCR的原理上来看，该检测方法对PCR体系的特异性要求较高。保证特异性可以从以下两方面着手：1 优化引物设计：常见手段之一是引入超过一个错配碱基，通常在3’端的倒数第二或第三位，与末端错配碱基共同作用，使不互补的扩增产物显著降低；同时减少PCR扩增的循环数，因为循环数增加会...
KASP是指竞争性等位基因特异性PCR(Kompetitive Allele Specific PCR),是一种基于PCR扩增后荧光检测的基因分型技术,最初由英国的KBioscience公司所开发,目前KBiosciences公司已被英国政府化学家实验室(LGC)收购。该方法是基于引物末端碱基的特异性匹配对SNP进行检测的方法,其技术原理如下: ...
ARMS-PCR技术的第一步是设计特异性引物。引物是用于扩增特定序列的短DNA片段。在ARMS-PCR中,设计引物的关键是确保对检测突变和野生型等基因型具有高度特异性。通常,ARMS-PCR引物由两对相互补的引物组成,一个用于扩增野生型(wild-type)基因型,另一个用于扩增突变基因型。这两对引物的设计要求: 1.引物长度大约为20...
ARMS PCR的原理基于PCR的扩增特性,通过引物的设计来选择性地扩增目标突变位点。ARMS PCR使用两对引物,一对是特异性突变引物,另一对是普通引物。特异性突变引物包含了与突变位点互补的序列,而普通引物则不包含。 在ARMS PCR的反应体系中,首先将DNA样本与核酸酶和热稳定DNA聚合酶一起加入PCR反应管中,进行预处理。然后...