作者进一步证明,RNA富集依赖于APEX2介导的标记。据我们所知,这是第一次在酵母中证明了基于邻近的线粒体转录组分析。 最后总结,作者筛选了一组炔烃修饰的芳香族APEX2底物,以提高活酵母细胞的标记效率。其中,Alk-Ph是最有效的探针,因为它具有高溶解度、...
Residues 1-27 of P450 oxidase 2C1 (N terminal on insert) V5 (C terminal on insert) ERM-APEX2(Plasmid #79055) Map
由于Atox1与其下游铜蛋白之间的相互作用是瞬时、微弱的,因此免疫共沉淀和酵母双杂等传统手段难以研究其相互作用。抗环血酸过氧化物酶(APEX2)标记技术能够在活细胞水平研究瞬时以及弱结合的蛋白-蛋白相互作用。 北京大学药学院王晶团队利用Ato...
目前用于邻近标记技术的酶主要有3种：辣根过氧化物酶（HRP ）、邻近依赖的生物素鉴定（BioID ）和工程抗坏血酸过氧化物酶（APEX ）。虽然第一个基于生物素邻近标记的研究是利用HRP 和芳基叠氮生物素做底物进行的[1]，但是HRP 在哺乳动物细胞质中并不活跃。在细胞质的还原环境中，HRP 的4个二硫键和2个Ca 2+...
APEX2)是一种能够有效地应用于研究活细胞内蛋白质与蛋白质的相互作用的方法.与其他传统的蛋白质互作研究方法相比,APEX2技术不仅可以允许靶向和邻近依赖性标记蛋白质,并且实现了亚细胞室的蛋白质组学定位以及动态蛋白质复合物的识别,现已成为蛋白质组学分析的一种新方法.主要总结了APEX2的技术发展及其在不同类型的蛋白...
近日,药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室王晶团队在学术期刊《Angewandte Chemie International Edition》发表了题为“APEX2-based Proximity Labeling of Atox1 Identifies CRIP2 as a Nuclear Copper-binding Protein that Regulates Autophagy Activation”(利用APEX2邻近标记技术鉴定铜伴侣蛋白Atox1细胞核内铜结合蛋...