扩增耐突变系统,又名等位基因特异PCR(allele specific PCR,ASPCR),它的基本原理是,TaqDNA聚合酶缺少3’+5’外切酶活性;在一定条件下PCR引物3’末端的错配导致产物的急剧减少,针对不同的已知突变,设计适当的引物可以通过PCR方法直接达到区分突变型和野生型基因的目的。这种方法最首要的一步就是根据已知的突变设计合适...
【技术原理】 采用一步法PCR技术,结合特异性引物对目的基因进行体外扩增,利用琼脂糖凝胶电泳技术对PCR扩增产物进行检测,根据特异性扩增片段的结果,判断待检样品中是否含有目的基因,实现检测结果的定性分析。本试剂盒具有灵敏性高、特异性强、反应时间短等优点,操作简便,价格低等特点。
实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括*定量和相对定量)和定性分析。
(一)原理 PCR是在模板DNA、引物和四种脱氧核 苷酸等存在的情况下,DNA聚合酶依赖 的酶促合成反应,整个扩增过程分三步。 精品课件 17 变性:加热,模板DNA形成两条单链 退火:降温,模板单链DNA与引物配对 结合 延伸:在DNA聚合酶及镁离子等存在的 条件下,引物3’端向前延伸,合 成与模板配对的新链 ▪ PCR由上...
【检验原理】 本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术,设计一对嗜吞噬细胞无形体(AP)特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光 PCR 技术对嗜吞噬细胞无形体(AP)的核酸进行体外扩增检测,用于对可疑感染者的病原学检测。 说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。 【储存条件及有效期】 -20℃±5℃,避...
基因工程技术能够对DNA进行相关操作:Electrophoresis凝胶电泳、Plasmid-based transformation质粒转化实验、 Restrictionenzyme analysis of DNA 限制性内切酶分析DNA、Polymerase Chain Reaction (PCR)聚合酶链式反应。 在真核生物中,遗传信息通过细胞周期、有丝分裂和减数分裂加受精等过程遗传到下一代:细胞周期分为间期和...
PCR过程中,TaqDNA聚合酶只能与引物的3′端结合并延伸子链。因此用PCR鉴定是否导入目的基因,所用的引物组成为图中的A和D。故答案为:(1)携带目的基因进入番茄细胞并整合到番茄细胞的染色体DNA 蛋白质 植物组织培养(2)BclⅠ和HindⅢ(3)1 2(4)氨苄青霉素 A和D分析甲图:图甲为构建重组质粒过程中的三种备选质粒...
扩增能力强:独有的PCR Stimulant,提升该酶对复杂模板的扩增能力。 扩增产物为平端,可直接克隆于pEASY®-Blunt系列载体中。 2 BL21(DE3) Chemically Competent Cell (CD601) 一款经特殊工艺制作的化学感受态细胞,转化效率高达107cfu/ug DNA以上。自上市...
(3)PCR技术的原理是 DNA半保留复制,通过PCR技术获取目的基因时需设计 2种引物,引物是一小段 能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。(4)图乙农杆菌中的质粒应含有T-DNA,其作用是 携带目的基因进入番茄细胞并整合到番茄细胞的染色体DNA...