将标签(如SBP)与特定基因融合表达,得到的融合蛋白可以采用链霉亲和素(strep)磁珠来亲和纯化,用生物素洗脱,最终得到蛋白复合物。实验组和对照组的洗脱蛋白分别做质谱,再从实验组结果中扣除对照组中的蛋白,即可得到与靶蛋白互作的蛋白。技术优势:1、AP/MS得到的互作蛋白是在细胞内与诱饵蛋白结合的,符合体内真实生理...
亲和纯化质谱(AP-MS)是发现新型PPIs的独特平台,可扩展到大规模分析(图2a)。利用亲和标记,AP-MS分离与靶蛋白物理结合的相互作用蛋白,并通过蛋白酶处理诱导这些蛋白裂解为多肽。产生的肽被电离,然后根据它们的质量电荷比(m/z)进行分离。 图3 整个液相色谱和串联质谱分析进一步增强了基于质谱的蛋白质组学的敏感性,这...
AP-MS已经成为发现蛋白质-蛋白质相互作用的标准方法。传统的方法是将天然蛋白免疫沉淀与质谱检测结合,然而AP-MS方法使用感兴趣的诱饵蛋白上的表位标签和捕获探针来识别协同的猎物蛋白,而不需要为每个新的诱饵蛋白购买或者开发特定抗体。此外,如果表位与相互作用所需的蛋白质界面重合,针对感兴趣蛋白质或诱饵的抗体可能会...
4.实验组和对照组的洗脱液分别用胰酶酶解,获得2组多肽混合物; 5.2组多肽混合物分别做LC-MS/MS,获得蛋白质的定性信息; 6.实验组结果中扣除对照组中的蛋白,即可得到与靶蛋白互作的蛋白。 技术流程图: 服务名称:亲和纯化/质谱 广州辉骏生物科技有限公司是一家由在生物医药领域具有资深科研资历人才组建的创新型科技企...
【答案】ap-ms原理整理如下,供大家学习参考。 Affinity Capture-MS是目前应用最广泛的蛋白相互作用研究方法。这种方法也被称为AP-MS(Affinity Purification coupled MS),即亲和纯化串联质谱分析。AP-MS的主要原理是基于特异性抗体或其他亲和试剂与靶标蛋白的亲和作用,通过免疫共沉淀(co-Immunoprecipitation)将靶标蛋白与...
亲和纯化质谱(AP-MS)是发现新型PPIs的独特平台,可扩展到大规模分析(图2a)。利用亲和标记,AP-MS分离与靶蛋白物理结合的相互作用蛋白,并通过蛋白酶处理诱导这些蛋白裂解为多肽。产生的肽被电离,然后根据它们的质量电荷比(m/z)进行分离。 图3 整个液相色谱和串联质谱分析进一步增强了基于质谱的蛋白质组学的敏感性,这...
亲和纯化质谱(AP-MS)是发现新型PPIs的独特平台,可扩展到大规模分析(图2a)。利用亲和标记,AP-MS分离与靶蛋白物理结合的相互作用蛋白,并通过蛋白酶处理诱导这些蛋白裂解为多肽。产生的肽被电离,然后根据它们的质量电荷比(m/z)进行分离。 图3 整个液相色谱和串联质谱分析进一步增强了基于质谱的蛋白质组学的敏感性,这...
AP/MS服务简介 与常规Co-IP实验类似,只是亲和纯化法可不用引入抗体。将标签(如SBP)与特定基因融合表达,融合蛋白用链霉亲和素(strep)磁珠亲和纯化,经生物素洗脱,即可得到蛋白复合物。将实验组和对照组的洗脱蛋白分别做质谱,在实验组结果中扣除对照组中的蛋白,即可鉴定出与靶蛋白互作的蛋白。
AP-MS实验: AP-MS与COIP-MS类似,只是不需引入抗体,将标签(如SBP)与诱饵蛋白融合表达,融合蛋白及其复合物用链霉亲和素(strep)磁珠亲和纯化,经生物素洗脱后,将实验组和对照组的洗脱蛋白分别做质谱,在实验组结果中扣除对照组中的蛋白,即可鉴定出与诱饵蛋白互作的蛋白。