2、选择Annexin-V的荧光染料时要考虑细胞的自发荧光，特别是培养时间久或药物处理的细胞，一定注意细胞代谢物药物本身的荧光，一般来说细胞代谢物的自发荧光会干扰FITC/PE，所以可建议用Annexin-V APC，药物的干扰可查看药物本身的发射光谱是否会对检测选择的染料有影响。3、细胞染色完成后，禁止固定，尽快检测完，可将...
✔ 左下象限(Annexin V-/PI-)：为正常的活细胞；✔ 右上象限(Annexin V+/PI+)：为晚期凋亡细胞或坏死细胞，细胞膜损伤的细胞DNA可被PI着染产生红色荧光；✔ 右下象限(Annexin V+/PI-)：为早期凋亡细胞，在细胞凋亡的早期PI无法着染，不会产生红色荧光信号。Annexin VPI检测法注意事项 • 检测贴壁细胞...
2、选择Annexin-V的荧光染料时要考虑细胞的自发荧光,特别是培养时间久或药物处理的细胞,一定注意细胞代谢物药物本身的荧光,一般来说细胞代谢物的自发荧光会干扰FITC/PE,所以可建议用Annexin-V APC,药物的干扰可查看药物本身的发射光谱是否会对检测选择的染料有影响。 3、细胞染色完成后,禁止固定,尽快检测完,可将检测...
① 空白管:阴性对照组细胞,没有染色的细胞。不加Annexin V/APC,7-AAD。用于调节电压。 ② 单染管:有明显凋亡的细胞,只加Annexin V/APC染色。用于调节补偿。 ③ 单染管:有明显凋亡的细胞,只加7-AAD染色。用于调节补偿 ④ 检测管:待测的处理细胞,加Annexin V/APC,7-AAD。用空白管和单阳管调节好电压补偿...
离心洗涤，再与漂浮细胞合并后上流式细胞仪检测。应用该法可降低晚期凋亡和坏死比例，增加早期凋亡细胞比例。3，由于Annexin-V为钙离子依赖的磷脂结合蛋白，只有在钙离子存在的情况下与PS的亲和力才大，因而在消化细胞时，建议一般不采用含EDTA的消化液。4，必须设置阴性对照和补偿对照(分别单染)。
2)神经细胞膜容易破坏外翻,导致假阳性,所以Annexin V/PI 双染法流式检测细胞凋亡不适用于神经细胞。 Q10: 关于荧光染料选择的问题 A10: 1)对于荧光染料的选择,建议如果流式细胞仪带有 488 nm 和 633 nm 两个或以上激光管,首先考虑用 APC 或 YF647 标记 Annexin V,因为它和 PI 通道几乎不用考虑光重叠问题...
单染管:阳性对照组细胞,只加 Annexin V-APC/只加 PI。用于调节补偿。 检测管:处理的细胞,加 Annexin V-APC/PI。用空白管和单染管调节好电压补偿后,获得所需要的流式数据。 2. 收集细胞。 (1) 对于悬浮细胞: a. 在进行完细胞凋亡刺激后,1000 rpm 离心 5 min,弃上清,收集细胞,用 PBS 轻轻重悬细胞...
不加Annexin V/APC,7AAD。用于调补偿。③ 未转染单染管:未转染且有明显凋亡的细胞,只加Annexin V/APC染色。用于调节补偿。④ 未转染单染管:未转染且有明显凋亡的细胞,只加7-AAD染色。用于调节补偿。⑤检测管:待测的处理细胞,加Annexin V/APC,7AAD。用空白管和单阳管调节好电压补偿后,获得所需要的流式数据...
Annexin V-APC 通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋亡细胞。常用的染料是7-AAD。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的,核酸染料7-AAD 不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,7-AAD 能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。
Annexin V-APC 通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋亡细胞。常用的染料是7-AAD。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的,核酸染料7-AAD 不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,7-AAD 能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。 7-AAD/Annexin V-APC试剂盒将Annexin Ⅴ与7-AAD匹配使用...