用荧光素（FITC、Alexa Fluor488等）标记的Annexin-V作为探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞，PI能够透过细胞膜而将细胞核染红。因此将Annexin-V与PI结合使用，就可以检测出细胞群体中...
✔ 右上象限(Annexin V+/PI+)：为晚期凋亡细胞或坏死细胞，细胞膜损伤的细胞DNA可被PI着染产生红色荧光；✔ 右下象限(Annexin V+/PI-)：为早期凋亡细胞，在细胞凋亡的早期PI无法着染，不会产生红色荧光信号。Annexin VPI检测法注意事项 • 检测贴壁细胞时，若不好控制消化时间，建议用Accutase细胞消化液，...
Annexin-V能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。用标记了APC的Annexin V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。细胞坏死的过程中也会发生细胞膜损伤,坏死的细胞会结合Annexin V-APC。Annexin V-APC通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋...
● 使用Annexin V-APC试剂盒检测凋亡需要针对活细胞。不要固定细胞,固定操作会对结果产生干扰。● 如果细胞样品中含有血小板,如血液样品,请使用含有EDTA的缓冲剂并200g离心洗去血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合。● 流式细胞仪检测时,细胞数量应不低于1×105。● 如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意用...
Annexin V-APC 细胞凋亡检测试剂盒可以方便快捷的检测凋亡细胞,使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。 储存条件:染色液2-8℃避光保存;结合液2-8℃保存;长期不用-20℃保存。 Annexin V-APC染色液避免反复冻融,冻融2次以上可能会失效。长期保存分装后-20℃保存。 有效期:一年。 ※※※ 使用前...
1)对于荧光染料的选择,建议如果流式细胞仪带有 488 nm 和 633 nm 两个或以上激光管,首先考虑用 APC 或 YF647 标记 Annexin V,因为它和 PI 通道几乎不用考虑光重叠问题,可以减少调节补偿的烦恼,如果只有 488 nm 激光管则可选择YF488/FITC 标记的 Annexin V。
流式细胞仪分析: 经处理过的细胞此时可以在流式细胞仪上分析。 按照常规的流式凋亡检测的操作即可。 Annexin V-APC的荧光最大激发波长652 m,最大发射波长670 m;PI荧光最大激发波长535 m,最大发射波长在620 m。 上机检测前,须用待测细胞制备质控样本来设定流式细胞仪的荧光补偿和设置十字门的范围: ...
2.Annexin V和PI双染组①通过55℃水浴处理10分钟,或加入凋亡诱导剂诱导细胞凋亡。然后,分别加入5µL的Annexin V和5µL的PI以进行双重标记。②实验组:直接加入5µL的Annexin V和5µL的PI。随后,在室温下避光孵育10至15分钟,加入400µL的Binding Buffer,并在流式细胞仪管中进行样本准备,确保在半小时...
用荧光素(FITC、Alexa Fluor488等)标记的Annexin-V作为探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI能够透过细胞膜而将细胞核染红。因此将Annexin-V与PI结合使用,就可以检测出细胞群体中的早期...
Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。因此将Annexin-Ⅴ进行荧光素(如FITC、PE)或生物素(Biotin)标记,以标记了的Annexin-Ⅴ作为探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 二、实验仪器和材料...