实验流程:(1)收集细胞:在进行完细胞凋亡刺激后,用预冷的PBS洗涤细胞2次,4℃离心5min,(贴壁细胞使用不含EDTA的胰酶消化);(2)重悬细胞:取1~5×105个重悬的细胞,离心弃掉PBS,加入Annexin V-FITC结合液轻轻重悬;(3)染色:加入Annexin V-FITC和PI Staining Solution,轻轻混匀;(4)孵育:避光、...
其中根据Annexin V染色分为左右两部分,右侧(Q2/3)为Annexin V染色阳性;根据PI染色分为上下两部分,上方(Q1/2)为PI染色阳性。一般认为Annexin V单染的细胞是凋亡早期的细胞,PI单染的细胞是已经死亡的细胞,而双染是凋亡晚期的。 左上象限Q1:(Annexin V-FITC)-/PI+,此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期...
中文名称:Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒 英文名称:Cell proliferation and toxicity detection kit 产品规格:20次|50次|100次 产品原理:Annexin V是一种分子量为35.8kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,广泛分布于真核细胞胞浆内,参与细胞信号转导。Annexin V能与磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称PS) 高...
艾美捷Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒注意事项:1.该试剂盒只能检测活细胞,而不能用于切片、擦刮、固定或浸润细胞样品的检测。2.细胞凋亡是一种持续变化的动态过程,选择合适的诱导时间对观察凋亡比较重要。染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加 3.如果有细菌或真菌污染,会严重...
所以,通过Annexin V和PI双染的方法,就可以把早期凋亡的细胞与晚期凋亡加坏死的细胞区分开来。Annexin V-FITC/PI法的实验步骤:1,细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300g离心5min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬细胞并计数。2,取1-5×10^5重悬的细胞,300g离心5min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,...
Annexin V-FITC/PI双染法基本原理 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)位于细胞膜的胞浆侧。细胞发生早期凋亡后,PS外翻到胞膜侧,Annexin V对PS有高度亲和力,用FITC标记Annexin V,PS外翻的细胞由于结合Annexin V-FITC发出绿色荧光。凋亡晚期,细胞膜结构受损,碘化丙啶(PI)透过细胞膜进入细胞,细胞同时发出红色荧光和绿色...
1、 Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG...
因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一.将Annexin V进行荧光素(EGFP、FITC)标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生.碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红...
4℃保存,Annexin V-FITC、PI 染色液需避光保存,半年有效。若长期保存,可以把PI 染色液适当分装后-20℃保存,Annexin V-FITC 结合液可以直接-20℃保存。 公司简介 南京沃博生物科技有限公司专注于生命科学和生物技术领域。 致力于为客户提供一系列高质量和有价格竞争力的产品,包括分子生物学、免疫学、生物化学和细胞...
一、Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测方法 原理:在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡最早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧,这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。