以HPRT基因中的12个位点为靶点,分别使用Alt-R® crRNA:tracrRNA、Alt-R® crRNA XT:tracrRNA、Alt-R® sgRNA,与Alt-R® Cas9核酸酶组装成3种RNP,加入2μM Alt-R® Cas9电穿孔Enhancer,转染HEK-293细胞,培养48小时后,通过二代测序检测总的基因编辑效率,结果显示其具有很好的稳定性。 2、化学修饰RNA,...
“千挑万选”高保真Cas9酶 —Alt-R®S.P. HIFI Cas9 对目标位点较高的编辑效率 基因编辑脱靶效应显著降低 与gRNA复合体形成RNP,细胞毒性低,不易引起免疫反应 怎样的神操作 60分钟进行CRISPR 基因编辑>> 人类干细胞上的测试结果表明,与其他高保真Cas9酶比, IDT新高保真Cas9酶呈现出稳定的中靶编辑活性,脱靶率又...
Cas9-GFP V3 和 S.p. Cas9-RFP V3 核酸酶是高纯度重组化脓性链球菌 Cas9 酶,表达为具有核定位序列 (nuclear localization sequences, NLS) 和 C 末端 6-His 标签的融合蛋白。这些酶具有与野生型 S.p. Cas9 相当的中靶性能,专门用于需要在转染后可视化蛋白质或使用荧光激活细胞分选 (FACS) 富集经编辑细胞...
Alt-R™ CRISPR-Cas9 crRNA, 200 nmol 订购请咨询 Alt-R™ CRISPR-Cas9 crRNA, 2 nmol, Plate 订购请咨询 Alt-R™ CRISPR-Cas9 crRNA, 10 nmol, Plate 订购请咨询 CRISPR-Cas9 crRNA XT Product Catalog # Alt-R™ CRISPR-Cas9 crRNA XT, 2 nmol ...
The Alt-R CRISPR-Cas systems from IDT work as follows: You receive chemically synthesized gRNA and recombinant Cas enzyme (either Cas9 or Cas12a). You can also obtain positive and negative gRNA controls, an electroporation enhancer, a DNA donor for homology-directed repair (HDR), and an HDR...
北京泽平代理的进口IDT(Integrated DNA Technologies)Alt-R™ CRISPR-Cas9基因编辑系统,提供免费序列设计工具,提供化学合成CRISPR-Cas9中crRNA(CRISPR-derived RNA)、sgRNA(small guide RNA)的定制合成服务,并生产商品化通用型tracrRNA(trans-activating crRNA)、化脓性链球菌S. pyogene来源并由E.coli大肠杆菌表达的高保...
RNP complexes (2 μM) targeting three genomic loci (MYC, HPRT1, and SAA1) along with 0.5 μM single-stranded Alt-R HDR donor oligo were delivered to HeLa cells by electroporation with 3 μM Alt-R Cas9 Electroporation Enhancer using the 4D-Nucleofector™ System (Lonza). The RNP complex...
Alt-R® CRISPR-Cas9实验流程 【方法一】 1、(使用IDT序列设计工具)设计Alt-R® crRNA,使其间隔区(Spacer)序列与DNA靶序列互补,提交给IDT定制合成crRNA; 2、将Alt-R® crRNA与Alt-R® tracrRNA混合,通过crRNA的重复序列区(Repeats)与tracrRNA碱基配对, 形成向导RNA(guide RNA,简称gRNA); ...
在Cas9蛋白使DNA发生双链断裂 (Double-strand break, DSB) 后,细胞会试图修复DBS,细胞修复断裂有两种主要途径:非同源末端连接 (Non-homologous end joining, NHEJ) 和同源介导修复 (Homology-directed repair, HDR)。NHEJ通路无需同源模板即可连接DBS末端,然而,NHEJ活性容易出错,经常会在断裂点引入小型插入缺失,导致...
在Cas9蛋白使DNA发生双链断裂 (Double-strand break, DSB) 后,细胞会试图修复DBS,细胞修复断裂有两种主要途径:非同源末端连接 (Non-homologous end joining, NHEJ) 和同源介导修复 (Homology-directed repair, HDR)。NHEJ通路无需同源模板即可连接DBS末端,然而,NHEJ活性容易出错,经常会在断裂点引入小型插入缺失,导致...