在0.5ml的无菌离心管中加入反应缓冲液、底物、上游引物、下游引物和Taq DNA聚合酶,总体积为50μl。 离心混合后,将离心管放入PCR仪。 进行PCR扩增,反应条件为:94℃预变性5分钟,然后进行25~30个循环,每个循环包括94℃变性1分钟,55℃退火1分钟,72℃延伸1分钟。📊 结果分析 通过PCR扩增,使得两个引物之间的片段得...
在定量PCR实验中,ACTIN常被用作内参基因,用来对样本中目标基因的表达进行标准化。如果ACTIN的Ct值很高,说明其在样本中的表达量较低,可能有如下原因:1、样本处理方式不当:如果分离RNA或者反转录RNA时处理不当,可能会导致部分RNA质量下降,从而影响内参基因ACTIN的表达。2、其他污染物影响:如果样本中...
β-Actin是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分,也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分。具有收缩功能,分布广泛。 β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是western Blot很好的内参指数。内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达...
定量或半定量PCR中内参的一种,全称是β-Actin
actin是一种肌动蛋白,由于在各个组织细胞的都有表达且表达量差异不大,通常作为内参来使用。如果你用β-actin做RT-PCR也效果不理想的话,那么说明你的cDNA有问题,需要重新进行反转录了。
带状疱疹减毒活疫苗目的:建立β-actin实时荧光聚合酶链反应(PCR)法,用于水痘减毒活疫苗和带状疱疹减毒活疫苗临床试验中样本采集有效性的判定,为临床试验中疫苗安全性判定和保护率的准确计算提供保障.方法:以β-actin质粒,水痘-带状疱疹病毒(VZV)为模板进行β-actin实时荧光PCR法体系的优化和灵敏度,特异性和重复性的...
1,首先需要根据三个目标基因及Actin的序列设计四对引物,引物设计原则同普通PCR引物,网上有很多介绍的,最好其中一个引物是结构基因部分序列+内含子部分序列这种模式。序列长一些25++,退火温度高一些(一般检测时常会60℃附近做两步法扩增),尽量选择错配情况少的引物组合。许多软件,如primer primer 5可以协助做引物设计。
本试剂盒用一对转基因件Rice Actin 启动子PCR试剂盒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对鸟类髓细胞瘤进行体外扩增检测【储存条件及有效期】-20℃避光保存、运输、避免反复冻融,有效期12个月。【适用仪器】ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。 上海沪峥专业生产销售转基因件Ric...
Homo/Mouse/Rat β-actin Regular RT-PCR Primer 用于普通RT-PCR的mRNA经反转录后得到cDNA,从而观察mRNA的表达水平。 技术参数 产品组份: β-actin上游引物:100μl(10μM) Forward 5-GCTSGTCGTCGACAACGGCTC-3 β-actin下游引物:100μl(10μM) Reverse: 5 应用实验类型: PCR 检测方法: - 特殊物理化学性...
番茄β-actin基因的PCR扩增dna琼脂糖凝胶电泳5tbe缓冲液稀释10倍配制成05tbe工作液待用称1g琼脂糖粉置于200ml锥形瓶加100ml05tbe稀释缓冲液用微波炉或电炉加热至琼脂糖全部熔化稍凉后加入5leb或其替代物将胶槽置入电泳槽中向槽内加入05tbe至液面恰好没过胶板上表面用微量移液器取10ldna样品与1l载样缓冲液混匀...