内参GAPDH和β-actin是不同的基因编码的蛋白产物。内参GAPDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶的英文缩写,它参与糖酵解过程,几乎在所有组织中都有表达。而β-actin是一种细胞骨架蛋白,在维持细胞形态和细胞运动中发挥重要作用,同样在几乎所有细胞中都有表达。在分子生物学实验中,两者常作为内参使用,但有所侧重。
管家基因,就是在每个细胞中都稳定表达而且表达量都大约相等的一种基因,它是衡量你加样量是否一致的参考。
B-ACTIN:即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白。2、分布方式不同:GAPDH:广泛分布于各种组织中的细胞。B-ACTIN:分布在骨架当中。3、作用不同:GAPDH:被广泛用作抽提total RNA,poly(A)+ RNA,Western blot等实验操作的标准化的内参。B-ACTIN:β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是Weste...
首先,GAPDH全称为甘油醛-3-磷酸脱氢酶,作为一种普遍存在于各种细胞组织中的酶,它的作用主要体现在实验操作中,如total RNA、poly(A)+ RNA的提取,以及Western blot等标准化的内参使用。相比之下,B-ACTIN,也称肌动蛋白,是一种细胞骨架蛋白,其分布更为定向,主要集中在骨架结构中。B-ACTIN在分子...
◆ 做诱导后或检测磷酸化、乙酰化等修饰型蛋白时,要选择β-actin和β-Tubulin等结构蛋白作内参,因为 GAPDH 是代谢类蛋白,表达量有可能会受到诱导处理的影响。 ◆ 检测血浆、乳汁、组织液等分泌样本时,由于这些样本没有完整的细胞结构,可选择分泌型蛋白Transferrin作内参。
精华评论 天蛇2012 β-actin就行 jl860822 内参的选择是和你的目的蛋白有关系的,两个蛋白不要相差太少,目前的国外文献中,很多都是在使用GAPDH作为内参蛋白检测, sarah-miao 一般选择β-actin比较多。。 张宇飞enjoy actin,DAPDH都可以,抗体也不贵,国产的就可以 ...
另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参 ...
3. beta-actin(细胞骨架蛋白)就是这样一种管家基因,它是细胞骨架微丝的基本构成单位,在各种细胞中表达一般恒定而较少变化,所以常用作RT-PCR等的内参。比较各组目的产物与其内参的比值就是相对定量啊。 real-time PCR实验中要求有内参作为参照,内参基因通常选择持家基因,如β- actin是较常用的内参基因,因为它在各种...
内参GAPDH,B-ACTIN有什么区别吗 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD。一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta ac