Primer AS(5→3):GGTGGTGAGGATGGAATTGTAG 所有引物均经过Primer-BLAST验证扩增产物特异,qPCR验证Melting Peak单峰、Cq值正常。 关于Actin为什么不叫基因名,因为β-actin和γ-actin的序列相似度极高,无法通过qPCR引物来区分。因此,Actin引物扩增出来的是β和γ-actin的总和。
ACTIN在研究中被发现最不稳定 引物为：Forward GAAGATCACTGCCTTGCTCC Reverse CGATAACAGCTCCTCTTGGC 其他较好的水稻内参基因为：18S rRNA Forward ATGATAACTCGACGGATCGC Reverse CTTGGATGTGGTAGCCGTTT Glyceraldehyde-3-hosphate dehydrogenase Forward GGGCTGCTAGCTTCAACATC Reverse TTGATTGCAGCCTTGATCTG Tubu...
以β-Actin为内参基因的实时荧光定量方法,在研究大黄鱼免疫、发育等相关基因的表达调控方面被广泛应用。大黄鱼β-Actin基因的基因组序列和开放阅读框序列长度相似,因此分别位于两个不同外显子上的普通实时荧光定量引物很容易与cDNA模板中的残留DNA结合,并扩增出一段长度略长的产物,从而影响实时荧光定量结果的准确性。为...
大黄鱼内参基因β‑Actin的实时荧光定量引物的检测方法,包括以下步骤:(1)利用所设计的引物,制备引物扩增产物片段,然后利用所述的引物扩增产物片段进行常规PCR扩增,得到PCR反应产物;(2)将所述的PCR反应产物用2~3%的琼脂糖凝胶电泳25~35分钟。本发明的引物具有成本低,准确性高的特点,本发明的检测方法具有操作简便...
不同引物对和退火温度对盐生植物盐穗木内参基因β-actin扩增效率的影响 白雪芹;杨瑞瑞;曾幼玲 【摘要】[目的]以盐生植物盐穗木为材料,研究不同引物对和不同退火温度对盐穗木内参基因β-actin扩增效率的影响.[方法]设计扩增β-actin基因的两对引物,标记为β-actin1和β-actin2,分别建立这两对引物扩增盐穗木β-actin...
摘要: [目的]以盐生植物盐穗木为材料,研究不同引物对和不同退火温度对盐穗木内参基因β-actin扩增效率的影响.[方法]设计扩增β-actin基因的两对引物,标记为β-actin1和β-actin2,分别建立这两对引物扩增盐穗木β-actin基因和特异性引物扩增该物种的过氧化物酶基因POD(盐响应的代表性基因),在不同退火温度下的标准...