目前监测病毒颗粒滴度或颗粒滴度比值的方法较多,例如酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)、透射电镜(Transmission electron microscopes, TEM)、高效液相色谱(High-performance liquid chromatography, HPLC)、分析型超速离心技术(Analytical UltraCentrifugation, AUC)等,...
本发明提供了一种检测AAV抗体滴度的方法,属于生物医学技术领域,包括:S1制备不同MOI值的无血清孵育的AAV载体;制备含不同体积的待测血清样本与已知MOI值AAV载体共孵育的混合液;S2:将含有CRISPR‑Cas9基因编辑系统的质粒加入电转液中,进行已知数量细胞的电转过程,分别加入步骤S1中的无血清孵育的AAV载体和混合液至电...
而本发明所提供的多重AAV病毒滴度 B 的检测方法中,通过不同腺相关病毒中的滴度校 7 准片段,所述第一滴度校准片段与第二滴度校准 5 6 2 片段可以具有相同的多核苷酸序列,能够实现多 2 1 3 个腺相关病毒的用量和比例的准确调整和优化, 1 1 N 提高了外源序列的拼接效率,继而最大化实现目 C 的基因的表达...
一种AAV滴度的检测方法专利信息由爱企查专利频道提供,一种AAV滴度的检测方法说明:本发明属于基因治疗领域,应用于腺相关病毒(AAV)生产过程中及最终纯化成品AAV病毒的滴度测定。通过...专利查询请上爱企查
利用杆状病毒系统获得携带抗体表达基因的双链AAV的研究 然后以同样的方法获得scrAAV8-AT7,检测其滴度,并感染HEK293 细胞以检测抗体的表达情况.蛋白印迹法检测出阿瓦斯汀(Avastin)重轻链已成功表达,ELISA检测出Avastin在... 刘海燕,钱其军 - 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 被引量: 0发表: 2013年 HSV/AAV嵌合...
使用本发明设计筛选的两个引物探针组,对AAV基因组滴度进行dPCR检测时,可直接准确定量重组腺相关病毒基因组拷贝数、无需依赖标准品和标准曲线,且对抑制物耐受程度高。本发明的检测方法操作简单、特异性强、重复率高、检测浓度范围宽,可用于AAV基因治疗药物研发和生产过程基因组滴度的测定,具有应用前景广阔。
一种多重aav病毒滴度的检测方法 技术领域 1.本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种多重aav病毒滴度的检测方法。 背景技术: 2.aav是dna小病毒,长度为4.7kb的单链dna基因组构成。天然存在的aav病毒基因组的两端的itr之间,包含有衣壳蛋白rep基因和复制相关蛋白cap基因的开放阅读框,改造后的aav表达载体切除了rep和...
24.实施例6 不同引物测定结果的比较用dnasei酶(0.08u/μl)处理纯化aav样品,37℃消化30分钟后98℃10分钟灭活消化;然后病毒裂解液proteinase k消化后,稀释样品,分别用目的基因特异性cmv引物和通用性itr引物进行qpcr体系扩增,用实施例1的方法进行qpcr定量检测。结果表明通用itr引物qpcr定量滴度比目的基因特异性引物定量滴...
10.根据权利要求1～9任意一项所述的方法,其特征在于,所述计算待测血清样本中 AAV抗体滴度步骤如下: S3‑1、根据无血清孵育的AAV载体不同MOI值和已知数量细胞计算AAV病毒粒子数,AAV 病毒粒子数=MOI×细胞数; S3‑2、根据无血清孵育的AAV载体检测到的报告基因的表达效率,制作多项式曲线,其 中以AAV病毒粒子数...
测定重组腺相关病毒基因组滴度的qPCR新方法 可或缺的顺式作用元件,针对ITR2以及ITR2-CMV设计的qPCR检测方法可以快速、准确地得到rAAV2的基因组滴度,由于该方法可以广泛适用,因此对推动AAV滴度检测的标准化有... 蒙青林,张彬彬,张春 - 《生物工程学报》 被引量: 3发表: 2013年 肠道病毒71型荧光RT-PCR检测方法的...