aav病毒粒子由60个vp亚基组成,组装衣壳的三个结构蛋白vp1:vp2:vp3的比例为1:1:10。vp1,2,3只在蛋白的n端序列上有差异,vp1,2都含有vp3的氨基酸序列,同时n端还有额外的其它氨基酸序列。aav的序列和结构决定了不同血清型aav与宿主细胞受体结合作用的差异,导致不同血清型的 aav 对不同的组织和细胞感染效率不...
基因组分为复制(REP)和衣壳蛋白质(CAP)的两个编码区,基因组两端都有反向重复序列(ITR)。REP编码与感染、整合和复制有关的四种蛋白质,Rep40、Rep52、Rep68和Rep78,而CAP编码三种蛋白,VP1,VP2和VP3,它们分别以1:1:10的比例组成AAV的60-mer衣壳。VP3是最丰富的,构成了外壳结构的外部,而VP1和VP2构成内部。
采用SDS-PAGE,银染法进一步分析rAVV的VP1,VP2 和VP3的蛋白总量和总蛋白的比例,分析rAVV的纯度。 (3)滴度质控: 通过qPCR的方法检测rAAV基因组滴度,单位为vg/mL。如下图所示,既能检测待测产品的病毒滴度,同时也体现了公司滴度测试体系的可靠性与稳定性。
AAV9 VP1, VP2, and VP3 identified according to their MW. Next, we calculated the ratio of total vg over the total TU as an indication of the infectivity of our final stocks (Figure 3D). Both PEI reagents resulted in comparable, yet slightly lower, vg-to-TU ratios than with HSV ...
2.根据权利要求1所述的重组腺相关病毒(AAV)衣壳蛋白,其肌肉向性与其亲本AAV9和/或AAVrh74衣壳蛋白的肌肉向性相似。 3.根据权利要求1或2所述的重组腺相关病毒(AAV)衣壳蛋白,其是杂合VP1、VP2和VP3蛋白。 4.一种多核苷酸,其以可表达形式编码根据权利要求1-3任一项所述的重组AAV衣壳蛋白,并最终进一步以可表达...
28.在一些实施方案中,肽修饰的杂合aav衣壳蛋白是肽修饰的杂合vp1、vp2或vp3蛋白。 29.在一些实施方案中,肽修饰的杂合aav衣壳蛋白具有至少骨骼肌组织的向性。在一些优选实施方案中,肽修饰的杂合aav衣壳蛋白对骨骼和心肌组织均具有向性。这种类型的肽修饰的杂合体的实例是seq id no:5的肽修饰的杂合aav衣壳(在实...
壳蛋白VP1。 13.根据权利要求12所述的分离的衣壳,其包含根据权利要求1至7中任一项所述的来 自腺相关病毒血清型9的修饰衣壳蛋白VP1、AAV9衣壳蛋白VP2或其修饰变体以及AAV9衣壳 蛋白VP3或其修饰变体。 14.根据权利要求13所述的分离的衣壳,其包含野生型AAV9衣壳蛋白VP2。 15.根据权利要求14所述的分离的衣壳,...
采用SDS-PAGE,银染法进一步分析rAVV的VP1,VP2 和VP3的蛋白总量和总蛋白的比例,分析rAVV的纯度。 (3)滴度质控: 通过qPCR的方法检测rAAV基因组滴度,单位为vg/mL。如下图所示,既能检测待测产品的病毒滴度,同时也体现了公司滴度测试体系的可靠性与稳定性。
The highest purity fractions (identified by the presence of the three bands corresponding to VP1, VP2, and VP3) were pooled and concentrated further in the final formulation buffer consisting of PBS supplemented with an additional 35 mmol/l NaCl40 using Amicon Ultra-15 Centrifugal 100K filters....
22、在本发明的一些实施方案中,分离的衣壳包括上述来自腺相关病毒血清型9(aav9)的修饰衣壳蛋白vp1的任一种、aav9衣壳蛋白vp2或其修饰变体以及aav9衣壳蛋白vp3或其修饰变体。 23、在本发明的一些实施方案中,分离的衣壳包括野生型aav9衣壳蛋白vp2。 24、在本发明的一些实施方案中,分离的衣壳包括具有由seq id no...