分别在Vglut2-Cre和Vgat-Cre小鼠的V1注射AAV1.EF1a.DIO.Flp,在SC注射AAVDJ.fDIO.YFP,可以看出被标记SC区域的Vglut2神经元要多于Vgat神经元。 图7,顺行跨神经元标记特定亚型细胞 例四,与功能测试相结合。在WT小鼠A1注射AAV1-Cre,在SC注射AAV1-EF1a-DIO-ChR2-EYFP,待病毒表达后蓝光激活SC神经元,测试其...
可顺向跨单级突触的血清型 — AAV1 2017年张砺教授等研究报道AAV1在高滴度条件下呈顺向跨突触传播,与Cre依赖的报告系统相结合,可高效和特异性地驱动Cre依赖的外源基因在突触后神经元中表达,标记突触后神经元。2020年该研究团队再次深入研究了AAV1顺向跨突触标记的作用机制——依赖于突触囊泡的释放,同时揭示了其...
AAV血清型种类多，不同的血清型对神经元有不同的感染特性。神经科学研究中常用的 AAV 血清型有 2、5、8、9、DJ、1/2、PHP、Anc80等，它们有高效转导神经元的能力，可根据标记的神经元选择合适的AAV血清型。2017年张砺教授等研究报道AAV1在高滴度条件下呈顺向跨突触传播，与Cre依赖的报告系统相结合，可高效...
2017年张砺教授等研究报道AAV1在高滴度条件下呈顺向跨突触传播,与Cre依赖的报告系统相结合,可高效和特异性地驱动Cre依赖的外源基因在突触后神经元中表达,标记突触后神经元。2020年该研究团队再次深入研究了AAV1顺向跨突触标记的作用机制——依赖于突触囊泡的释放,同时揭示了其在多种神经环路中的广泛应用,为AAV作为...
引入AAV1后，研究者可以在特定脑区注射跨突触AAV1-Cre病毒，然后在目标区域下游注射AAV-DIO-ChR2，通过给光激活特定的神经元通路，从而精确确定特定行为或功能相关的神经元。AAV1跨突触能力的实现并非普遍现象，仅有AAV1和AAV9具有跨突触能力，且在滴度较高时效果更佳。在实验中，Zingg等人的研究...
逆向跨突触病毒已成功应用于识别转导神经元的突触前神经元,而用于标记突触后靶向神经元的顺行跨突触工具仍在不断开发中。2017年张砺教授团队研究报道AAV1能在高滴度条件下呈顺向跨突触传播,与Cre依赖的报告系统相结合,可高效和特异性地驱动Cre依赖的外源基因在突触后神经元中的表达,以标记突触后神经元。2020年该研...
Cre重组酶与HIV-TAT肽的简单共注射能够成功将Cre传递到小鼠神经细胞中,Cre的递送成功激活了大脑皮质中神经元和星形胶质细胞中报告基因的表达,而不会造成组织损伤,其转导效率与常用的腺相关病毒相当或更好。研究数据表明,传递肽介导了有效...
腺相关病毒 (AAV) 是Dependovirus属Parvovirus家族的无包膜病毒。AAV对人无致病性,只有在辅助病毒如腺病毒或疱疹病毒存在下才能复制。AAV基因组是约4.7 kb的单链线状DNA分子,在每个末端都有发夹结构的反向末端重复序列 (ITRs) ,ITRs的功能在于基因组复制起始位点及包装病毒粒子。AAV基因组包含了3个开放阅读框 (图...
该研究基于Cre-LoxP、CRISPR/Cas9等超敏DNA记录技术,发现AAV9-Tnnt2载体在肝脏中广泛泄漏表达,向AAV9-Tnnt2转基因的3’-UTR引入miR122TS,能大幅降低其在肝脏组织中的表达泄漏,提高其心脏特异性。研究者将优化后的AAV载体应用于心梗小鼠的基因...