免疫荧光染色显示，敲除RNF128可降低动脉粥样硬化斑块中SRB1的表达，免疫组化检测发现斑块内炎症细胞因子 TNFα、IL1β 和 IL6 显著减少，Masson染色表明敲除组小鼠斑块中胶原蛋白含量增加，说明RNF128抑制不仅减缓动脉粥样硬化发展，还使斑块表型更稳定。进一步将AAV-PCSK9 静脉注射RNF128fl/flLyz2cre和RNF128fl/fl...
因此,PCSK9已成为动脉粥样硬化干预的关键靶点。 图3. PCSK9与肝细胞表面LDLR结合(Alkindi M, et al. Can J Cardiol. 2016) 四、AAV造模 通过种系基因工程导致高胆固醇血症可在动物身上实现动脉粥样硬化,但这种模型仅限于少数物种,且很难与基因操作等技术结合。于是,Bjørklund MM等人利用腺相关病毒(AAV)表达...
PCSK9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9),前蛋白转化酶枯草溶菌素转化酶9,kexin样前转化酶枯草杆菌蛋白酶家族的第九个成员,定位于1p32.3染色体,由692个氨基酸组成,是脂质稳态的一个关键调控因子。PCSK9属于细胞内“转化酶”或脱羧酶, 在啮齿类动物中,PCSK9主要在成年肝细胞中表达,在小肠和肾脏中表达较...
造模病毒详情 应用案例:AAV诱导的AS模型 动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种慢性进行性炎症性疾病,由于在动脉内膜积聚的脂质外观呈黄色粥样,因此称为动脉粥样硬化。AS是大多数心血管疾病(冠心病、心绞痛、心肌梗死、缺血性心肌病、猝死以及隐匿性冠心病等)的根本原因。AS模型构建包括转基因鼠及AAV-PCSK病毒造模等。
3. AAV-PCSK9 造模方法 动脉粥样硬化模型对于我们了解疾病的发病机制,并开发其治疗方法具有重大意义。目前,载脂蛋白E缺陷(ApoE-/-)和低密度脂蛋白受体缺陷(LDLR-/-)小鼠是应用比较广泛的动脉粥样硬化小鼠模型,但是,这些通过生殖系基因工程技术在小鼠内建立的模型需要复杂而耗时的回交。近年来,科学家建立了一种快速...
注射AAV-PCSK9可提高肝脏中PCSK9的表达水平,降低LDLR的蛋白水平 结果展示 1. IP6K1与apoA-I和UBE4A形成复合物 作者发现敲除IP6K1可提高循环apoA-I水平和肝细胞中的apoA-I蛋白水,阻断IP6K1活性可通过增强稳定性来提高apoA-I蛋白水平。为了研究IP6K1的作用机制,作者对IP6K1和apoA-I进行了免疫沉淀,发现E3泛素...
使用Pcsk9-D377Y作为造模工具，是近几年新出现的动脉粥样硬化急性模型构建方法。利用ApoE启动子使PCSK9在肝脏中高度表达。在正常生理情况下，PCSK9能结合LDLR并促进其在肝细胞中的降解。研究发现过表达突变的Pcsk9，能加速LDLR的降解，严重影响血浆中LDL-C的清除能力，最终导致高脂血症，诱导动脉粥样硬化的发生。野生...
最近,前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9 型(PCSK9)-腺相关病毒(AAV)小鼠已被用作快速、多功能且具有成本效益的动物模型 动脉粥样硬化研究[2]。相比较转基因小鼠模型消耗的时间和人力,利用AAV快速建立实验模型已经成为越来越多科研工作者的选择。PCSK9-AAV就是一个方便快捷的造模工具。
AAV-PCSK9如何应用于动脉粥样硬化造模? 巨噬细胞来源的泡沫细胞形成是动脉粥样硬化斑块的标志,RNF128 作为一种膜定位的泛素连接酶,其在动脉粥样硬化中的作用未知;SRB1在巨噬细胞中的作用存在争议,且其泛素化修饰对oxLDL内吞的调控机制有待探索。2025年3月4日,山大齐鲁医院张澄、张猛教授联合山大基础医学院高成江...
作者使用AAV-PCSK9和肝细胞特异性IP6K1敲除小鼠构建了动脉粥样硬化模型，发现肝细胞特异性IP6K1 KO小鼠肝脏中apoA-I的蛋白水平、血浆中apoA-I和HDL的水平仍然高于对照组，HDL胆固醇水平较高，LDL胆固醇水平较低。作者还验证了IP6K1缺失引起的血浆apoA-I水平升高并增加胆固醇外排的可能性，发现肝细胞特异性IP6K1 ...