为了筛选出能穿透血脑屏障并在整个中枢神经系统中有效转导的AAV血清型,研究者将衣壳文库静脉注射到成年GFAP-Cre小鼠中,这些模式小鼠能够特异性在星形胶质细胞中表达Cre。一周后,从脑和脊髓组织中分离DNA,并设计引物,对有Cre介导重组的恢复衣壳序列顺序的基因组进行PCR扩增。 研究者将整个cap文库克隆到rAAV-cap-in-c...
并且验证了GfaABC1D启动子的靶向性。结果表明GfaABC1D+AAV5的方案能够最好的达到星型胶质细胞的靶向性。 在靶向少突胶质细胞的AAV注射上,下面这篇文献[5]采用的是吉凯基因的AAV9搭配广谱性的CMV,双侧髓内注射的方式,滴度和体积分别为1.04 E+13vg/ml,0.5...
值得注意的是,rAAV11可以高效且特异性靶向星形胶质细胞,为星形胶质细胞的研究提供了更加有力的病毒工具。 图3. rAAV11靶向星形胶质细胞启动子:GfaABC1D;实验动物:C57BL/6J小鼠;注射部位:齿状回(DG)区; 病毒用量:2×109VG/mice(Han et al.bioRxiv preprint, 2022) AAV-cMG & AAV-MG:高效靶向小胶质细胞 ...
GfaABC1D 星形胶质细胞特异性启动子 0.9kb human 1600 肝脏 TBG 肝脏特异性 0.4kb human 2900 骨骼 Col2a1 软骨细胞特异性启动子 1.2kb human 2100 Runx2 成骨细胞早期特异性启动子 1kb mouse 2300 皮肤 K14 角化细胞特异性启动子 1.5kb human 1700 肌肉 Myog ...
图8. rAAV11 靶向星形胶质细胞启动子：GfaABC1D；实验动物：C57BL/6J 小鼠； 注射部位：齿状回（DG...
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一个具有代表性的例子是在CNS星形胶质细胞中起作用的的 2.2 kb 人神经胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) 启动子及其681 bp缩短版本的 gfaABC1D启动子。后者表现出与全长 GFAP 启动子相同的表达模式,甚至比全长 GFAP 启动子的活性高了 2 倍(图4)。此外,一些肌肉特异性...
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WG-CRA-004pAAV-Alb-Cre肝脏特异性cre WG-CRA-005pAAV-hsyn-Cre-WPRE神经元特异性cre WG-CRA-006pAAV-GFAP- Kozak sequence-Cre-T2A-EGFP星形胶质细胞特异性Cre WG-CRA-007pAAV-GfaABC1D- Kozak sequence-Cre-T2A-EGFP星形胶质细胞特异性Cre WG-CRA-008pAAV-Iba I- Kozak sequence-Cre小胶质细胞特异性...