1. 分子克隆:构建ConVERGD载体,包括设计含有核糖核酸酶、loxP位点和eGFP编码区的寡核苷酸,并将其插入到AAV载体中。 2. 体外测试:在神经母细胞(N2a细胞)中进行共转染实验,以测试ConVERGD在不同重组酶(Cre、Flp)存在下的表达情况。 3. 体内验证:在小鼠大脑蓝核(locus coeruleus, LC)中注射ConVERGD载体,以验证其...
利用AAV病毒载体可实现广泛表达，也可实现部分细胞类型的特异性表达；基于Cre或Flp系统，利用AAV搭载DIO或...
有几种不同的措施或者方法可以驱动 AAV 在特定细胞/组织中的基因表达，包括启动子、 Flp 或 Cre 依赖性基因开关、以及血清型。如果您打算广泛表达，那么广泛活性的启动子，例如 CAG 是一个不错的选择。如果您具有特定的靶细胞类型，则可能需要尝试其他启动子，例如Camk2a 是特定于神经元的。12. 空壳AAV会对实验...
2、特异性:有一些不同的rAAV成分可以驱动特定细胞/组织中的基因表达; 这些成分包括启动子,Flp或Cre依赖性基因开关,以及血清型(血清型将在下面更详细地讨论)。如果您的目标是广泛表达,那么广泛活跃的启动子,如CAG(具有CMV即时早期增强子的鸡β肌动蛋白启动子),是一个不错的选择。如果您有特定的靶细胞类型,您可能...
C:其他工具与功能基因:自噬、Cre&Flp 重组酶及新冠、猴痘相关基因等; 3、特色AAV产品 ①小鼠gRNAAAV载体库:近13000个小鼠靶基因、AAV载体可直接转染细胞,也可包装病毒注射动物,搭配 Cas9细胞株/动物使用; ②AAV血清型筛选试剂盒:内含11种AAV血清型,助力快速筛选理想血清型; ...
在选择 AAV 工具时，有四个关键因素需要考虑：载货量、特异性、血清型和基因组。载货量限制了基因传递的大小，但通过设计包含两个基因的单个 rAAV 载体或共感染，可以解决这一问题。特异性涉及使用启动子、Flp 或 Cre 依赖性基因开关和特定的血清型，以实现目标细胞或组织中的基因表达。血清型的选择会...
一些Frt突变体也能被Flp识别,包括F3等,通常这些突变体只能与自身相同序列发生重组。在同一个DNA分子上,根据发生重组的两个FRT序列的方向不同,处于这两个序列之间的序列会发生缺失或是颠倒。 hSyn启动子,也称为hSyn1启动子,从人突触素蛋白1(Synapsin1)的启动子区克隆得到,长度为0.5kb左右,神经元特异表达。
现货rAAV:1,500+现货病毒载体库,涵盖光遗传学、化学遗传学、钙/电压指示剂、神经递质探针、Cre/Flp重组酶等工具类AAV,满足您从示踪标记、生理调控到观察验证的全面灵活服务需求。 rAAV载体常用血清型列表 ※注:以上AAV基因型均为2型。和元生物新血清型AAV发现系统AAVneOTM持续发现新型AAV,请关注和元生物公众...
基因工程化的AAV能转导外源基因，借助特定启动子、光遗传学/化学遗传学元件、钙指示剂、神经递质探针或Cre/lox P，Flp／FRT重组酶技术，可选择性地标记特定的神经元。越来越多的神经环路研究使用AAV作为神经示踪工具。AAV血清型种类多，不同的血清型对神经元有不同的感染特性。神经科学研究中常用的 AAV 血清型有 ...
基于启动子的选择(表3),利用AAV病毒载体可实现广泛表达,也可实现部分细胞类型的特异性表达;基于Cre或Flp系统,利用AAV搭载DIO或FDIO可高精度靶向特异类型神经元或者细胞;同时结合使用Cre和Flp系统,可选择性靶向特定类型神经元的亚类细胞,不同组织脏器的亚类细胞,并进行结构与功能研究。 2. 神经示踪 利用AAV病毒载体(...