有几种不同的 rAAV 成分可以驱动特定细胞/组织中的基因表达;这些包括启动子、Flp 或Cre依赖性基因开关和血清型(血清型将在下面详细讨论)。如果您的目标是广泛表达,那么具有广泛活性的启动子,例如 CAG(带有 CMV 立即早期增强子的鸡 β 肌动蛋白启动子,chicken beta actin promoter with CMV immediate early enhancer...
另一方面,可以将具有Cre或Flip依赖性基因表达的rAAV载体注射到在特定细胞类型中具有Cre或Flp表达的动物中,这样能过做到仅在这些细胞中表达基因。 5、腺相关病毒(AAV)载体表达时间需要7-14天,还能更快吗? 答案当然是肯定的。文章“Self-complementary Recombinant Adeno-Associated Virus (scAAV) Vectors Promote ...
1. ConVERGD策略能够通过核糖核酸酶介导的mRNA切割,在重组酶(Cre和Flp)存在的情况下,实现基因表达的调控。 2. ConVERGD策略相比现有的交叉表达平台,如INTRSECT,具有更大的交叉靶向能力,最多可以实现五个基于重组酶的特征交叉,并且可以容纳更大的和更复杂的载荷。 3. 在体内实验中,ConVERGD策略能够特异性地表达在C...
在选择 AAV 工具时，有四个关键因素需要考虑：载货量、特异性、血清型和基因组。载货量限制了基因传递的大小，但通过设计包含两个基因的单个 rAAV 载体或共感染，可以解决这一问题。特异性涉及使用启动子、Flp 或 Cre 依赖性基因开关和特定的血清型，以实现目标细胞或组织中的基因表达。血清型的选择会...
基因工程化的AAV能转导外源基因，借助特定启动子、光遗传学/化学遗传学元件、钙指示剂、神经递质探针或Cre/lox P，Flp／FRT重组酶技术，可选择性地标记特定的神经元。越来越多的神经环路研究使用AAV作为神经示踪工具。AAV血清型种类多，不同的血清型对神经元有不同的感染特性。神经科学研究中常用的 AAV 血清型有 ...
一些Frt突变体也能被Flp识别,包括F3等,通常这些突变体只能与自身相同序列发生重组。在同一个DNA分子上,根据发生重组的两个FRT序列的方向不同,处于这两个序列之间的序列会发生缺失或是颠倒。 hSyn启动子,也称为hSyn1启动子,从人突触素蛋白1(Synapsin1)的启动子区克隆得到,长度为0.5kb左右,神经元特异表达。
基因工程化的AAV能转导外源基因,借助特定启动子、光遗传学/化学遗传学元件、钙指示剂、神经递质探针或Cre/lox P,Flp/FRT重组酶技术,可选择性地标记特定的神经元。重组AAV基因传递效果好、缺乏致病性和安全性高、宿主细胞范围广、在体内表达时间长,是目前最有前途和最成功的基因治疗载体之一。 送TA礼物 1楼2022-...
Cell type specificity can be achieved by serotype selection (tissue propensity), choice of promoter (e.g. neuron specific), or dependent gene switches (dre, flp, cre)26,31,32. To achieve faster transgene expression self-complementary (sc) AAVs have been developed through which higher and ...
Data points represent independent transfections with the following constructs: 56 (FLEx(FRT)eGFP alone or +pDIRE), 6 (CV-eGFP-W3SL +Flp, +pDIRE; CV-eGFP-WPRE, +Flp, +pDire; Ef1a-CV-eGFP-WPRE, +pDIRE) 5 (INTRSECT-EYFP, +Cre, +Flp, +pDIRE; CV-eGFP-W3SL, +Cre; CV-eGFP-...
如果你有特定的靶细胞类型,你可能想尝试不同的启动子,例如CamkⅡa作为一个神经元特异性的启动子。另一方面,具有Cre-或Flip依赖基因表达的rAAV载体可以注射到特定细胞类型表达Cre或Flp的动物体内,从而基因只在这些细胞中表达 3 .血清型:衣壳蛋白是非常重要的rAAV载体元件,并驱动这些载体的生物学功能。尽管多项研究...