使用不同PAGE胶,用普通SDS-PAGE电泳缓冲液或本产品进行电泳。 将本产品配合6%固定浓度胶*1进行电泳时,与梯度胶一样,可在8~230 kDa的大范围内进行分离。 样品使用DynaMarker Protein MultiColor StableⅡ(#DM660)*2。 *1 使用预制胶时,适用凝胶浓度可能会有...
1 SDS-PAGE的正确打开方式 PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。 SDS 十二烷基硫酸钠(SDS)是一种阴离子去污剂,它在水溶液中以单体和分子团的混合形式存在。 SDS-PAGE 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SD...
4)利用泵或注射器上样,收集流出液,以便SDS-PAGE检测蛋白结合情况。 注:若样品粘度增加,即使上样体积很少也会导致层析柱很大反压;上样量不要超过柱子的结合能力;大量样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。 5)Wash Buffer 平衡柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6×)(SDS-PAGE Protein Loading Buffer, 6×),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的6倍浓缩的蛋白上样缓冲液。可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。本缓冲液已经含有还原剂DTT,有轻微刺激性气味。 该产品含有变性剂和还原剂,不适用于非变性电泳。
本产品作为蛋白质电泳Loading Buffer,适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳时的蛋白样品制备和上样。蛋白上样缓冲液是一种以溴酚蓝为染料, 6×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液,用于常规的SDS-PAGE 蛋白电泳样品上样。 操作步骤 1. 按每5 微升蛋白样品加入1 微升6×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和蛋白上样...
2)将样品加至NTA层析柱中,流速在15ml/h左右,收集穿透部分,用于SDS/PAGE分析蛋白质的结合情况。 3)层析用5倍NTA体积的NTA-0Buffer洗,流速控制在30ml/h左右。 4)分别用5倍NTA体积的NTA-20、NTA-40、NTA-60、NTA-80、NTA-100、NTA-200、NTA-1000Buffer洗脱,流速控制在15ml/h左右,收集洗脱液,每管收集一个NT...
聚丙烯酰胺凝胶具有高分辨率,能够分离不同大小的蛋白质。 SDS-PAGE测定蛋白质分子量的优势和局限性 广泛适用性 SDS-PAGE可用于各种蛋白质的分子量测定,具有广泛的适 用性。 准确性 SDS-PAGE测定蛋白质分子量相对准确,可应用于科研和临 床诊断等领域。 SDS-PAGE测定蛋白质分子量的优势和局限性 对样品要求高 SDS-...
(1)当我们把混合样品通过SDS-PAGE电泳分离之后,理论上可以通过所得条带的分子量来鉴定目的蛋白是否存在,但是这种鉴定受到很多因素的干扰,非常不准确。因此我们需要进一步使用Western blot (蛋白质印迹法)来鉴定血清中的IgG含量的多少。 凝胶上的蛋白质条带
本品用于带有His标签的蛋白纯化时拥有稳定性高、 复杂环境中一步纯化蛋白、目标蛋白质吸附量大(但会低于Ni-NTA)、蛋白洗脱条件温和、介质易再生、重复利用率高等 优点。 产品性质 基质高度交联的6%琼脂糖凝胶 粒径45-165µm 载量~10mgHis-taggedprotein(40KD)/mL基质 耐压0.3MPa,3bar 储存缓冲液20%乙醇 PH...
7)将样品加至NTA层析柱中,流速在15ml/h左右,收集穿透部分,用SDS/PAGE分析蛋白的结合情况。8)层析用5倍NTA体积的NTA-0 Buffer洗,流速控制在30 ml/h左右。9)分别用5倍NTA体积的NTA-20、NTA-40、NTA-60、NTA-80、NTA-100、NTA-200、NTA-1000 Buffer洗脱,流速控制在15ml/h左右,收集洗脱液,每管收集一个NTA...