1）准备甲醇和ddH2O；2）配制1× PBST：500 mL 1× PBS+0.25 mL tween 20；3）配制5%的BSA封闭液：2.5 g的BSA溶解到50 mL 1x PBST中；4）配制一抗，二抗：用5%的BSA封闭液按说明书推荐比例稀释(一般新买的培养基可以进一步稀释使用)；5）10× running buffer电泳缓冲液：30.2 g Tris，144 g Glyci...
取1g BSA,加蒸馏水,定容到100ml就行了。 一般常见的稀释液是自己配置5%脱脂奶粉或者5%BSA溶液。 最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的BSA,封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。 特别是用单抗腹水直接包被,因其中大量非抗...