方法:CCK8法检测GLE对4种肿瘤细胞系A549、SW199O、SKOV3及HGC27增殖的影响；流式细胞术检测GLE对肿瘤细胞凋亡和细胞周期的影响;RT-PCR检测凋亡和细胞周期相关基因mRNA表达;Westem blot检测相关蛋白表达。结果: GLE时间-剂量依赖性地抑制4种肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，降低Bcl2/Bax比值，上调cleaved caspase-3...
明确张力蛋白4(TNs4)在结直肠癌中的表达,初步探讨调控其基因表达的 表观遗传学机制;探讨TNS4表达的临床意义以及是否可作为结直肠癌预后判断的 分子标志物。 实验方法 应用免疫组织化学染色及免疫印迹技术检测139例CRC组织和其中95例配对 组织的TNS4蛋白表达,部分标本应用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测mRNA的 ...
Novex Tris-甘氨酸凝胶(WedgeWell 规格)具有创新的楔形孔,与其他 1.0 mm 厚的凝胶相比,样品上样量高出两倍。楔形孔的开口也更大,使上样更容易。若要将蛋白转印到膜上,我们推荐使用 Novex Tris-甘氨酸转印缓冲液 (LC367),以使用 Invitrogen 小型印迹模块 (B1000) 进行传统湿式转印。转印时还可使用 Invitrogen ...
NativePAGE Bis-Tris 凝胶系统具有近中性 pH 环境,可以为蛋白和凝胶基质提供较大稳定性,从而对非变性膜-蛋白复合物进行高度灵敏的分析,且相对于传统 Tris-甘氨酸预制胶系统能够提供出色的条带分辨率。我们推荐使用用于传统湿式转印的 NuPAGE 转印缓冲液和 PVDF,以将蛋白转印到膜上。NuPAGE 转印缓冲液可维持电泳过程...
按"2.2"项下方法处理细胞,经 PBS 漂洗后, 加入含蛋白酶抑制剂的 RIPA 裂解液,冰上裂解 15 min 后,23 号针头反复吹打破碎细胞,4 ℃,12 000 r/min 离心 10 min,取上清液,BCA 法测定蛋白浓 度.将上清液与 SDS 上样缓冲液混匀,95 ℃加热 5 min 使蛋白变性.蛋白样品经十二烷基硫酸钠-聚 丙烯酰胺凝胶...
1.2实验材料:1.2.1试剂(1)0.45μmpvdf膜:millipore公司;(2)脱脂奶粉:伊利;(3)彩色预染蛋白分子量标准:fermentas公司;(4)eclplus发光试剂盒、sds-page蛋白上样缓冲液(5×)、western及ip细胞裂解液、pmsf、bca蛋白浓度测定试剂盒购自碧云天公司;(5)tris-hcl/sds(1.5mm,ph8.8)、tris-hcl/sds(0.5mm,ph6.8)购...
均匀平滑的白色滤纸兼容用于蛋白和核酸印迹中的乙醇及其他有机试剂,同时能够在转印时使缓冲液均匀地从凝胶流向印迹膜。 转印滤纸有如下厚度可供选择: 加厚— 用于 Trans-Blot? 半干或 Trans-Blot 转印槽(按凝胶大小预切割的片状形式) 厚— 用于 Mini Trans-Blot 槽、Criterion? 转印设备以及 Bio-Dot? 和Bio-Dot...
高表达CXCR4可通过乳酸脱氢酶A磷酸化诱导肺腺癌细胞产生吉非替尼耐药
综上所述,岩黄连可激活 NH 大鼠耳蜗核组织 PLC/IP3 通路蛋白表达,缓解胆红素对耳蜗核听力 神经系统的损伤,可能为阐明岩黄连改善高胆红素 沉积所致听力神经毒性作用机制提供一定参考,但 高胆红素沉积所致神经毒性机制复杂,可能涉及其 他通路,岩黄连的具体生物学机制仍需深入研究. 利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突...
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体 积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录. 推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨.为了进一步裂解组 织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融.最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟, 取上清...