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4%多聚甲醛( paraformaldehyde,PFA)因其优良的理化性质成为目前固定标本组织的常用固定剂之一,而关于其配制方法,尤其是用于溶解它的溶剂的选择目前还未有定论。本研究以此问题为出发点,比较不同溶剂的4%PFA对鼠脑组织的固定效果,探讨最佳的组织固定方法。 1材料与方法 1. 1材料: 1)实验动物: SPF级怀孕的CD1小鼠...
4%多聚甲醛(paraformaldehyde,PFA)因其优良的理化性质成为目前固定标本组织的常用固定剂之一,而关于其配制方法,尤其是用于溶解它的溶剂的选择目前还未有定论。本研究以此问题为出发点,比较不同溶剂的4%PFA对鼠脑组织的固定效果,探讨最佳的组织固定方法。1材料与方法1.1材料:1)实验动物:SPF级怀孕的CD1小鼠,雌性,取材...
1%多聚甲醛固定细胞10 min后,加入细胞裂解液超声裂解5 min,于4℃下以12 000 r/min离心10 min,取20μL作为Input,加入一抗4℃孵育过夜,离心后去上清,加入洗脱缓冲液,室温孵育10 min,离心后收集上清,65℃6 h,纯化DNA,参考1.2.4进行qRT-PCR检测。NLRP3 TSS正向引物5′-CTCTCTGCCTCTGCTCTG ATA-3′,NLRP3 ...
小鼠心脏置于4%多聚甲醛溶液固定,在临近心尖部1/3处平行于房室沟横切得到3~4 mm厚度心肌组织,经脱水、透明、石蜡包埋等处理后,制作成5 μm切片。将所得切片摊展、烘干,并于58℃烤片后放置室温过夜待完全自然干燥。按苏木精–伊红...
我是把多聚甲醛放到烧杯里,用电炉加热。大概15分钟就可以溶解。请问这样会破坏多聚甲醛的性质吗?会...
取各组雌鼠第二对乳腺组织,于4%多聚甲醛中固定24 h,石蜡包埋,切片(3~4 μm)。使用二甲苯脱蜡,依次放入无水乙醇、95%乙醇、70%乙醇、蒸馏水浸泡2 min,苏木素染色10 min,蒸馏水洗30s,0.5%盐酸乙醇分化,自来水洗5 min,PBS反蓝后0...
取相同部位的肝脏,于 4%多聚甲醛中固定,石蜡包 埋,切片经脱蜡,苏木素-伊红(HE)染色,光学显 微镜下观察肝组织形态变化.qRT-PCR 检测肝组织 TFR1 , PTGS2 和 ACSL4 mRNA 表达 , Western blotting 检测肝组织 TFR1,GPX4,PTGS2 和 ACSL4 蛋白表达. 2.9 统计学分析 数据通过 GraphPad Prism 8.0 软件分析并...
小鼠心脏置于4%多聚甲醛溶液固定,在临近心尖部1/3处平行于房室沟横切得到3~4 mm厚度心肌组织,经脱水、透明、石蜡包埋等处理后,制作成5 μm切片。将所得切片摊展、烘干,并于58℃烤片后放置室温过夜待完全自然干燥。按苏木精–伊红(HE)染色步骤进行染片,以中性树胶封片,于通风橱内晾干后置倒置显微镜下观察并拍照...
2.4 大鼠肺的外观形态观察与样品采集 于末次给药 24 h 后处死各组大鼠,立即观察其双肺 的颜色,质地,形态,体积等外观变化;然后于腹主动脉 取血 5 mL,分离血清或血浆并于-80 ℃下冷藏,备用; 取左肺下叶组织适量,用 4%多聚甲醛溶液固定,备用; 取右肺组织适量,经液氮速冻后于-80 ℃下冷藏,备用. 2.5 ...