1蛋白表达增加(P<0 05);Vimentin(红色荧光)和PCK(绿色荧光)双阳性率>90%,HPMC组HPMC细胞形态结构较正常、细胞核呈不规则多边形,1 50%PDS组和2 50%PDS组HPMC细胞核呈不规则多边形、可见少量自噬,4 25%PDS组HPMC细胞中积累了与自噬相关的...
右上叶部分肺组织切成直径lmm大小的组织块,立即置于3%的戊二醛溶液中,预固定24h,Os04后固定2h,梯度乙醇及丙酮脱水,EPON812包埋,超薄切片,醋酸铀.枸橼酸铅双染色,透射电镜观察。1.3肺组织免疫荧光与免疫组化标记右上叶肺组织立即用0Tc包埋,恒冷切片机切成厚度5IInl切片,粘于APEs胶片上,室温干燥30min左右。4℃丙酮...
分别取切片和细胞爬片,经醋酸铀及枸橼酸铅双重电子染色,日立H-600Ⅳ型透射电镜观察、摄片、图象分析。以图像分析软件Image-Pro Plus6.0对自噬小体进行定量分析。 25 FISH:miRNA,参考PMID:03 激光共聚焦---参考文本 观察海马CA1区,计数每张切片三个相邻视野内NF-κB p65免疫阳性细胞数,结果取三个视野的平均值。
Epon-812树脂包埋,超薄切片机切片,经2%醋酸铀、2.6%枸橼酸铅溶液染色,干燥后在透射电子显微镜(HT7800,日本日立)上观察高龄组和年轻组患者颗粒细胞的线粒体超微结构,并采集图像。 4. 细胞ATP的检测:按照ATP检测试剂盒(上海碧云天)说明书...
Caspase-3参与白花败酱草皂苷诱导Hela细胞凋亡
300目铜网上。分别叏切片和细胞爬片,经醋酸铀及枸橼酸铅双重电子染色,日立H- 600Ⅳ型透射电镜观察、摄片、图象分析。以图像分析软件Image-Pro Plus6.0对自噬小 体进行定量分析。 25 FISH:miRNA,参考PMID: 29372117 03 激光共聚焦---参考文本 观察海马CA1区,计数每张切片三个相邻视野内NF-κBp65免疫阳性 细胞数...
肺纤维化进程中发挥的作用,采集牦牛正常肺组织和发生纤维化的肺组织,将其分为对照组和试验组,通过HE染色、Masson染色及透射电镜观察肺超微结构的病理变化及纤维化状态;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(WB)、免疫组化和免疫荧光染色法检测和定位Collagen1、Collagen3基因和蛋白的表达情况。结果显示,...
体积培养液,TNF-α刺激48 h后收集细胞于1.5 mL EP管中,400×g离心10 min,弃去上清液,4 ℃戊二醛中过夜;PBS清洗3次,每次10 min,后经4 ℃的1%锇酸固定1.5 h,常规乙醇和丙酮梯度脱水,环氧树脂浸透、包埋、聚合;制备厚度0.5 μm半薄切片光镜定位后,再制备60 nm厚度超薄切片,醋酸铀和枸橼酸铅染色,透射电子...
切片,醋酸铀、枸橼酸铅双染后,行透射电子显微镜观察细胞超微结构并摄片。 2.3小梁细胞爬片的制作 取传2代接近融合的细胞以0.25%的胰蛋白酶和O.02%EDTA消化后以4X105 个/ml细胞的浓度传代接种于预置有消毒盖玻片的6孔培养板中,继续置于37℃ 5%C0:培养箱中培养直至接近融合,取出盖玻片,PBS充分漂洗后,用4%的多...
电镜超薄切片3 (5)包埋(embeding):目的:包埋的目的是让包埋剂完全浸透到组织内部,经加温逐渐聚合成坚硬的固体,成为细胞结构的支架,能够承受切片的各种力的作用,有利于切薄片。包埋剂的性质:①粘度适中,有良好的切割性能。②能耐受电子束的轰击,高温不易升华、不变形。③透明度好。④对人无害。...