1. 细胞复苏:将冻存管迅速放入37℃水浴锅中,1分钟内完成,轻轻摇晃以促进融化,注意不要让冻存管完全浸入水中,避免污染。2. 离心:在15ml离心管中加入3ml完全培养基和1ml复苏后的细胞,颠倒混匀,以800-1000rpm室温离心3-5分钟,然后弃去上清液。3. 细胞重悬:用1ml完全培养基重悬细胞,转移到含9ml完全培养基的10c...
首先,咱们得先学会怎么冻存细胞。随着传代次数增加,293T细胞的生长状态会下降,甚至可能出现突变。所以,一开始就得大量冻存细胞,这样才能保证实验的稳定性和持续性。 对数生长期冻存 📈 在细胞对数生长期进行冻存是个不错的选择,这样可以增加细胞复苏的成活率。具体操作是:先把细胞上清液倒掉,用D-Hank's液洗掉残...
为了优化293T细胞的生长环境，建议使用经过TC处理的专用培养器皿，例如NEST品牌的细胞培养瓶或细胞工厂。这些器皿经过特殊处理，能够更好地适应293T细胞的生长需求，从而减少脱落现象的发生。NEST细胞工厂 NEST品牌的细胞工厂，专为293T细胞设计，经过特殊处理，能够提供优越的生长环境。其独特的结构与材质，有助于减少细胞...
一、293T细胞的冻存 1.随着传代的次数增加,293T细胞会出现生长状态下降,出现突变等。所以要在细胞购进时就进行大量冻存,以保证实验的稳定性和持续性。 2.在细胞对数生长期进行冻存,增加细胞复苏成活率。 3.倒去细胞上清液,加入D-Hank's液洗去残留的培养基。 4.加入0.25%的胰酶,消化10-20s后倒去。 5.镜...
293T、ips、T细胞培养与复苏.docx,细胞培养与复苏 一、293T细胞(贴壁培养细胞) 完全培养基配制 500ml DMEM+50ml血清+5.5ml MEM NEAA(非必须氨基酸),加完混匀,500ml滤器过滤,标记好名称、姓名、日期等。 细胞传代及培养 体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就
🔬我曾向隔壁课题组借了一支293T细胞,结果它们就是不贴壁。我尝试重新复苏,但师姐似乎不太理我,这让我感到非常失望。 💡在复苏细胞时,血清的热灭活是一个关键步骤。你是否进行了这个步骤呢?网上有说法称细胞过夜就能贴壁,但我的细胞已经两天了,还是不见好转。 🔍你是否也遇到过类似的问题?你是如何解决的?欢...
293t复苏一天后不贴壁聚成一团，培养基颜色正常，是怎么回事？细胞不贴壁，就是死亡了。这个现象非常...
前两天复苏了一管-80度保存了三四个月的293T,复苏后观察,48h时细胞密度倒是挺高的,但是很多细胞是圆球形的,还飘着,都没有贴壁,复苏3天换液后过夜培养,观察还是类似的情况,想问一下为什么出现这种情况? 冻存液是10%二甲亚砜,90%血清 没有液氮罐,所以-80度冰箱保存,37℃融化后加入2ml培养液里1000rpm离心5...
复苏24h 刚复苏镜下看的时候细胞是很密集的,24小时的时候就报团了赞 回复 转发 赞 收藏 只看楼主 momo 楼主 2024-09-07 22:27:39 江苏 已经联系复苏几次了都这样 赞 回复 清晨之夏 2024-09-30 14:21:28 上海 你让它长长,聚团可能是冻的时候就没有完全消化成单细胞或者复苏没吹散,先传2代...
年前冻存时是一个10cm大皿冻了两管,现在要做实验复苏的时候用的6cm中皿,长了24h传代时巨密无比,传第一代就死得轰轰烈烈了(传第二代的时候发现状态不好,还憨憨地帮老师铺了个六孔板,第二天被狠狠嘲笑了😭) 后来1:1又传了一代还是无用,只能忍痛丢弃。 祭奠一下我刚复苏就惨死的293T-EGFP稳系🥲...