在复苏293F细胞时,将冻存的细胞离心去掉DMSO后转入10毫升293TII中,这样可以获得更高的细胞密度,复苏速度更快,第二天就能进行传代。在玻璃瓶中培养细胞时,务必在培养基中加入抗生素,并用双层锡箔纸封盖,再用橡皮筋扎紧。瓶口要用酒精灯烧两遍,确保无菌操作。在进行多个1L细胞转染时,可以将PEI与DNA的孵育时间设置...
2、从摇床中取出293F细胞。用1 mL移液枪滴缓慢滴加转染混合液,边加边摇晃摇瓶使转染更加充分。 3、转染后将悬浮细胞置于摇床中培养,条件为37℃、8%CO2、110 rpm。每隔24 h进行细胞计数并用台盼蓝染色液观察细胞的存活率。 注意事项: 1、DNA纯度: 使用去内毒素的质粒大提试剂盒,细菌产生的内毒素对细胞状态...
293细胞转染试剂价格:价格电议产品详情:polysciences代理,polysciences中国,polysciences 24765-1 PEI ... 包装规格:1G 用途:转染试剂 货号:23966-1、24765-1 品牌:polysciences 是否危险化学品:否 细胞转染相关产品报价更多> 产品标题价格产地公司名称更新日期 ...
QCKXR-S 是一款专用于悬浮细胞转染的DNA转染试剂,可用于质粒DNA在悬浮生长细胞中的传送。它适用于大规模蛋白生产,及工业化生产中的真核细胞转染。具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。 【试剂厂家】西安凯新生物科技有限公司 应用范围: QCKXR-S转染试剂特别适用于293F和CHO-S等悬...
本发明提供一种HEK293F悬浮细胞高效电转染方法,该方法通过对电转染时的电压强度、脉冲次数、脉冲间隔时长、电击时长等方面进行优化,实现了对悬浮培养的HEK293F细胞的高效电转染,其在电转时无需配制电转染缓冲液,即可得到较高的转染效率。该方法可用于不同质粒转染悬浮培养的HEK293F细胞,得到大量的目的蛋白(如抗体...
①免疫荧光②wb检测③在蛋白后面加gfp ④蛋白后面加抗生素抗性基因等等
为构建真核表达载体pCEP4/EGFP,PEI介导瞬时转染293.F细胞,观察转染效率,优化转染条件.通过 NotI和Hi ndⅢ酶切位点将增强型绿色荧光蛋白基因( EGFP) 插入真核表达载体pCEP4中,并转化Trans5a感受态细胞,氨苄青霉素筛选培养,挑取阳性克隆扩增后提取质粒,酶切鉴定正确后,PEI介导转染293.F细胞,流式细胞仪检测转染效率。
本发明提供一种HEK293F悬浮细胞高效电转染方法,该方法通过对电转染时的电压强度、脉冲次数、脉冲间隔时长、电击时长等方面进行优化,实现了对悬浮培养的HEK293F细胞的高效电转染,其在电转时无需配制电转染缓冲液,即可得到较高的转染效率。该方法可用于不同质粒转染悬浮培养的HEK293F细胞,得到大量的目的蛋白(如抗体、...
本发明属于转基因技术领域,尤其涉及一种hek293f悬浮细胞高效电转染方法。 背景技术: 脂质体转染方法是目前用的最多的转染方法,脂质体包裹dna形成dna/脂质体复合物,细胞通过内吞的方式将dna转入细胞内。但是dna的质量对转染效率影响非常大,小剂量的内毒素、盐离子、蛋白和多糖等都会影响复合物的形成,因此低质量的dna...
1.转染前细胞的铺板密度、细胞状态 2.转染的时间 3.转染试剂与质粒的比值 干扰载体转染293T 细胞48h 的图片，供参考。293T 细胞生长速度更快，形态较293A 细胞小，贴壁性比293 细胞弱很多，消化时间更要注意，没培养过的刚接手细胞要在注意留种的同时多试验消化几次，掌握经验值。293 细胞常用于腺病毒包装、...