SDS*(电泳用)1.0 g 蒸馏水10.0 mL 2.1.5(5号液)过硫酸铵(APS)溶液 2 过硫酸铵100 mg蒸馏水1.0 mL临用前配置 2.1.6(6号液)N,N,N’,N’-四甲基乙二胺(TEMED) 2.1.6电泳缓冲液 Tris3 g甘氨酸14.4 g 4号液10ml加蒸馏水至1 000 mL 2.1.5样品缓冲液 2号液0.5 mL 4号液4 mL甘油2 mLβ-巯基...
0.5mlCPW溶液中 800rpm离心3min 加入3mlCPW培养基，用滴管重新悬浮原生质体 5 4、原生质体融合 （1）调整密度：用血球板计数后，将原生质体的密度调整为106个原生质体/ml。（2）配置PEG融合液（无菌下）PEG溶液：甘氨酸缓冲液：DMSO=8：1：1（3）将愈伤组织原生质体和叶肉原生质体等体积混合。6 （4）原生质体...
内毒素标准溶液的配制 1. 溶解:取一支标准品,加入细菌内毒素检查用水不超过 1.0 mL,复溶后置旋涡混匀器上混匀 15 分钟,得到溶解即为 10EU/mL 的内毒素标准品溶液。 2. 稀释:上述内毒素溶液可用细菌内毒素检查用水进一步稀释成各个不同的浓度梯度,稀释时应在旋涡混合器上混匀 1 分钟。每一步稀释的稀释...
1. 按每1 微升蛋白样品加入1 微升2×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(2X)。 2. 100℃或沸水浴加热5 分钟,以充分变性蛋白。 3. 置冰上5 分钟,10000rpm 离心1 分钟,取上清直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
附:试剂的配制 1.溶液Ⅰ 50mmol/L 葡萄糖 5mmol/L 三羟甲基氨基甲烷(Tris) Tris·HCl (pH8.0) 10mmol/L 乙二胺四乙酸(EDTA)(pH8.0) 2.溶液Ⅱ 0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合 3.溶液Ⅲ 5mmol/L 乙酸钾 60 ml 冰乙酸 11.5 ml ...
尽管碱性溶液使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。只要OH-处理的强度不要太过，当pH值恢复到中性时，DNA双链就会再次形成。在裂解过程中，细菌蛋白质、破裂的细胞壁和变性的染色体DNA会相互缠绕成大型复合物，后者被十二烷基硫酸盐（SDS）包盖。当用钾离子（来自...
溶液Ⅰ 50mM 葡萄糖 / 10mM EDTA / 25mM Tris-HCl,pH=8.0葡萄糖增稠,使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部;EDTA 抑制DNase的活性.这一步溶液中还可以加入RNase,不受EDTA影响,并且可以在后续步骤中被除去溶液... 分析总结。 溶液50mm葡萄糖10mmedta25mmtrishclph80葡萄糖增稠使悬浮后的大肠杆菌不会快速...
5.12%SDS-PAGE胶配制方法 去离子水13.2ml 30%丙烯酰胺溶液16ml 1.5MTris-HCL 10ml 10%SDS 0.4ml 10%AP 0.4ml TEMED 0.016ml 1)30%聚丙烯酰胺储液 丙烯酰胺150g75g 甲叉双丙烯酰胺4g2g 去离子水定容至500ml250ml 该溶液需要滤纸过滤,棕色瓶4度冰箱保存。 2)10%SDS 称1gSDS加10ml水溶解 3)10%AP 称0.1...
1. 即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。 2. 抑制谱广,由多种蛋白磷酸酶抑制剂组成,能特异性地抑制酪氨酸磷酸酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶。 3. 本产品为优化的蛋白磷酸酶抑制剂混合水溶液。与各种细胞裂解液兼容,在裂解液中加入1/100体积即可。
有关SDS的表面张力问题我用表面张力仪测定SDS的CMC,配置了2mmol/L 5mmol/L...依次到14mmol/L的SDS水溶液.但是测量结果发现,随着浓度的增加,表面张力反而越来越大,不只是溶液配制的问题,还是什么