18S rRNA作为内参的原因可总结如下:①18S rRNA存在于核糖体小亚基中,其编码基因rDNA(18S rRNA/rDNA)在生物演化过程中相当保守;②存在于所有真核生物细胞中; ③易于使用通用引物扩增;④rRNA的合成是由RNA聚合酶I合成,mRNA是由RNA聚合酶II合成,因此rRNA合成的调节独立于mRNA,在影响mRNA表达的各种条件下,各种rRNA水平...
18SrDNA是相对于基因组而言,18SrDNA转录后即为18SrRNA。18SrDNA在生物中是最为保守的基因之一,所以也常用来进行生物分类的依据。由于18SrRNA在生物中的表达比较保守,所以目前也用来作为内参. 二、18srRNA内参问题 1用18s RNA作为RT-PCR的内参,应该和β-actin是一个道理,半定量的目的是要看总RNA中的目的基因mRNA...
18S rRNA 作为小麦、苜蓿和杜鹃 qRT-PCR的内参基因,探究其表达丰度是否适合作为这 3 种植物的内参基因. 结果表明 18S rRNA 在这3 种植物中的表达丰度均过高,Ct 值均小于 15,影响目的基因定量的准确性. 因此,在目的基因的表达量低时,18S rRNA 不宜作为这 3 种植物的内参基因.关键词: 18S rRNA;qRT-PCR;...
这个是不行的,需要用random primers来做反转录引物。oligo dT适合真核生物的mRNA的反转录,而这个 rRNA不同于mRNA,没有polyA尾巴,因此用oligo dT是不能反转录出rRNA的。反转录过程由反转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA...
18SrDNA是相对于基因组而言,18SrDNA转录后即为18SrRNA。18SrDNA在生物中是最为保守的基因之一,所以也常用来进行生物分类的依据。由于18SrRNA在生物中的表达比较保守,所以目前也用来作为内参。 二、18srRNA内参问题 1用18sRNA作为RT-PCR的内参,应该和β-actin是一个道理,半定量的目的是要看总RNA中的目的基因mRNA...
由于18SrRNA在生物中的表达比较保守,所以目前也用来作为内参。二、18srRNA内参问题1 用18s RNA作为RT-PCR的内参,应该和-actin是一个道理,半定量的目的是要看总RNA中的目的基因mRNA的表达量,内参的目的是去除一些系统误差。2 有文献做过比较,之所以18s RNA比-actin好是因为它含量丰富,且任何情况下稳定存在,所以...
摘要:本研究对多重PCR体系各成分和循环参数进行了摸索和优化,建立了以18SrRNA为内参照的同时检测三种百 合病毒的多重RT-PCR体系,所检测的三种病毒为侵染我国百合的主要病毒:黄瓜花叶病毒(CMV)、百合斑驳病毒 (LMoV)和百合无症病毒(LSV)。用RNeasyPlantMiniKit提取总RNA,然后加入三种病毒特异性反向引物和18S rRNA...
卢-actin>18SrRNA>gpd,故一actin和18SrRNA较适合作为研究法夫酵母JMU-MVP14定量实验的内参基因。 关键词:实时定量PCR;法夫酵母;标准质粒;标准曲线 中图分类号:Q786 文献标识码:A 文章编号:1007-7146(2013)04-0379-06 EstablishmentofStandardCurvesandStandardPlasmidsfor1日}-actin, ...
(1) 研究核糖体生物学:18S rRNA 基因序列的研究有助于深入了解核糖体的结构、功能及其在蛋白质合成过程中的作用。 (2) 研究生物进化:18S rRNA 基因序列在不同生物种类中的保守性和变异性可以为生物进化研究提供一定的依据。 (3) 研究基因表达调控:18S rRNA 基因序列可以作为内参基因,用于研究其他基因的表达水平。
专利摘要:本发明属于白及基因组技术领域,具体涉及两个在高温条件下稳定表达的高温内参基因Bs18SrRNA和BsUBI。所述Bs18SrRNA基因,含有1792bp;所述BsUBI基因,含有422bp。本申请中,基于正常生长温度和高温胁迫条件下的对比,对部分候选内参基因的表达稳定性进行了实时荧光定量PCR分析,综合分析结果表明:Bs18SrRNA和BsUBI...