目前最主要的可变区选择是V4区和V3V4区,V4区长度为256bp左右,加上两侧引物长度为290bp左右,使用双端2x250bp或2x150bp可以测通,此外如454、life、Illumina Hiseq 4000的测序平台读长也可以主要涵盖该区段读长。例如采用Illumina Hiseq测序平台对该项目进行双端测序(Paired-end),测序得到了fastq格式的原始数据(样本...
16SrRNA 测序技术是最常用的高通量测序依赖的组学技术之一,该技术不用对微生物进行分离培养,直接提取样本里面所有微生物的基因组,利用合适的通用引物扩增16S rDNA/18S rDNA /ITS等高变区或功能基因,采用高通量测序仪Miseq、Hiseq或Novaseq对其进行测序,通过生物信息学分析可以获得特定实验样品中细菌、真菌或古菌等的物...
基于大量项目经验和文献调研, 目前最主要的可变区选择是V4区和V3V4区,V4区长度为256bp左右,加上两侧引物长度为290bp左右,使用双端2x250bp或2x150bp可以测通,此外如454、life、Illumina Hiseq 4000, Illumina Novaseq 6000的测序平台读长也可以主要涵盖该区段读长。 •16S V4 引物通用性是所有可变区中最高的 ...
作者考虑到肠道是物质(Pros)被吸收利用的主要场所,因此分析肠道基因的表达差异或许可以挖掘出上游基因的调控机制。于是,作者借助RNA-seq,使用DESeq2进行差异分析。PCA结果显示NC组和0.8 g/kg Pro组之间有明显的分离,说明Pro治疗对肠道组织中的基因表达模式有显著影响。与NC组相比,Pro组中有1035个上调基因和874个下调...
一. 16S-seq实验 所用示例数据使用Illumina公司两步PCR的方法进行扩增: 1st stage PCR, 使用含adaptor的16S rRNA基因的通用引物,比如505F-80R,799F-1192等; 2nd stage PCR, 使用含P5/P7,index,和adaptor的引物,给每个样品的序列加上特定的index 测序使用2x250bp双端测序。
16S分析流程主要包括:Hiseq/Miseq测序获得的Paired-end (PE) reads拼接成一条序列,对目标序列进行质控过滤,过滤后的序列与参考数据库作比对,去除嵌合体序列得到最终得优化序列。基于优化序列进行OTU聚类分析和物种分类注释,基于OTU聚类结果进行多样性指数分析,基于分类学信息进行物种结构分析和物种差异分析。
实验方法:16S rRNA基因测序(小鼠粪便)+代谢组检测(小鼠脑脊液、血清和粪便)+单细胞测序(小鼠前额叶皮质(mPFC))+RNA-seq(小鼠mPFC) 研究思路: 从以下五个维度层层递进开展研究, 行为学水平——肠道菌群缺乏与恐惧记忆消退的关系 转录组水平——恐惧消退学习是否改变mPFC转录组 ...
簇细胞,杯状细胞,Paneth细胞和肠内分泌细胞(或AtohKO缺乏)的比例均正确(图3A–D);对于簇细胞,消除了ATOH1独立的簇状细胞后,其数量经抗生素处理的野生型回肠中显著减少,这与少数ATOH1依赖的簇状细胞的持久性一致(图3C和E);此外,使用p-Creode分析簇状细胞的常规途...
Cas9系统特异性剪切水稻rRNA序列的gRNA spacer序列,所述gRNA spacer的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～16任意一条序列所示.本发明提供的特异性gRNA spacer序列形成的gRNA序列能够引导Cas9实现16Sseq测序文库中水稻rRNA序列的特异性切割,实现16Sseq测序文库中微生物rRNA序列的富集.本发明为利用这种改进的16Sseq技术分析植物附属...
1、在 RNA-seq 中,获得 MS 与 C 组的8819个差异表达基因 (DEGs) 和 HS 与 C 组的12814个DEGs,其中 MS 与 C 组和 HS 与 C 组共有3903个DEGs,但仅1 652个 DEGs 被成功注释。共有的 DEGs 在与粘蛋白合成相关的通路中显著富集; 2、组织学观察表明,热应激显著减少了皮肤黏膜细胞的数量,并诱导了表皮...