V3-V4区域是16S rRNA基因中最常用的扩增区域之一，因为这两个区域具有足够的可变性来区分不同的细菌种类...
16S rRNA基因的V3-4区域和V4区域在进行微生物群落分析时有一些不同的特点。 1.序列覆盖范围: V3-4区域:覆盖16S rRNA基因的第三和第四可变区。这个区域比V4区域更长,提供更广泛的序列信息。 V4区域:只包含第四可变区。这个区域较短,但仍能提供关于微生物群落的有用信息。
针对于细菌的16S rRNA基因序列分析,MiSeq凭借其测序读长长、测序周期短、通量大等特点,成为使用最为普遍的测序平台。目前用于16S rRNA基因深度测序的区域主要有V4区,V3-V4区、和V4-V5区等。 需要扩增的特定16S rRNA基因区域引物 生物信息学分析基本内容 16S rRNA基因测序区域和测序深度对菌群α多样性指数分析具有明...
针对于细菌的16S rRNA基因序列分析,MiSeq凭借其测序读长长、测序周期短、通量大等特点,成为使用最为普遍的测序平台。目前用于16S rRNA基因深度测序的区域主要有V4区,V3-V4区、和V4-V5区等。 需要扩增的特定16S rRNA基因区域引物 生物信息学分析基本内容 16S rRNA基因测序区...
试图确定对16S rRNA V3V4与V4基因区域的一步或两步PCR的建库方案对上呼吸道和下呼吸道微生物组的影响 对收集的样本进行了三个设置下的lllumina MiSeq测序 设置1(两步PCR,V3V4区域) 设置2(两步PCR,V4区域) 设置3(一步PCR,V4区域) 分别对这三个设置产生的测序数据进行分析 ...
16S rRNA基因扩增子测序是目前微生物群落研究的首选方法。但是关于程序差异的比较研究很少。 对人类粪便样本和模拟群落进行了测序。 针对不同可变区域(V -region)范围(V1-V2、V1-V3、V3-V4、V4、V4- v5、V6-V8、V7-V9)进行研究,以了解由于引物选择不同导致的结果差异。
因此,16S rRNA基因被认为是最适于细菌系统发育学研究和物种分类鉴定。目前用于16S rRNA基因深度测序的区域主要有V4区,V3-V4区、和V4-V5区等。 16S测序实验流程 将检测合格的环境微生物DNA样本对其指定区域进行PCR扩增、文库制备、文库质检、定量,使用设定的TAG序列进行样本区分。采用Illumina Hiseq 2500高通量测序平台...
原核微生物的16S rRNA基因长度约为1500 bp,二代测序平台对应扩增引物一般选用V3-V4区域或V4区域,三代测序平台可选用全长扩增引物(27F/1492R)。 图1. 16S rDNA基因序列组成示意图 (蓝色为可变区,白色为保守区) 02 18S rDNA测序 18S rDNA为编码真核生物核糖体小亚基rRNA的DNA序列。对 18S rDNA某个高变区进行...
文章作者给出的结论是文库制备和测序方法的选择会对呼吸道微生物组的分析产生影响,且对上呼吸道的影响小于下呼吸道。靶向扩增子区域的差异(16S rRNA基因V3 V4与V4)并未表现出对细菌群落描述的重大影响。对于整篇研究存在的主要的局限性在于仅研究了DNA提取后的PCR步骤,污染或影响也可能来自于更前期的处理。
本文试图确定对16S rRNA V3V4与V4基因区域的一步或两步PCR的建库方案对上呼吸道和下呼吸道微生物组的影响对收集的样本进行了三个设置下的lllumina MiSeq测序设置1(两步PCR,V3V4区域)设置2(两步PCR,V4区域)设置3(一步PCR,V4区域)分别对这三个设置产生的测序数据进行分析结论PCR步骤数量的差异会影响对呼吸道微...