研一新手速成WB 试剂配制 纯干货分享!不同分离胶的配方见图二,不同分离胶的根据所跑目的蛋白分子量进行选择,主要如下: 6%分离胶,适用75-200kDa 8%分离胶,适用50-150kDa 10%分离胶,适用23-120kDa 12%分离 - 科研日记于20230903发布在抖音,已经收获了96个喜欢,来抖音
15%的分离胶分不开小分子量蛋白粉原因是不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样。公斤查询相关信息表明百分之15的分离胶适合45kDa的分目的蛋白,百分之10的分离胶适合70kDa的目的蛋白。
不知道分子量的情况下就尽可能选择浓度高的分离胶,因为浓度低的胶很有可能蛋白就跑出去了。先用高浓度的胶跑一次,然后看条带 蛋白分离纯化_菌淼-传承德国先进技术,行业先进品牌 上海菌淼专注于制药、生物制药、新材料、化工等行业,为客户提供固液分离设备整套方案蛋白分离纯化_欢迎来电咨询:13818500291广告 哪位能查...
1. 4%分离胶 4%的分离胶属于较低浓度的分离胶,其对应的最适蛋白分子量范围为100 kDa以下。由于孔径较大,适合用于分离较大分子量的蛋白质。 2. 6%分离胶 6%的分离胶对应的最适蛋白分子量范围为10-200 kDa。适用于分离中等分子量的蛋白质。 3. 8%分离胶 8%的分离胶对应的最适蛋白分子量范围为10-100 kD...
15%的胶应该是没问题的,跑的时间长一些,距离长一些就能跑开。上样量得看你蛋白的表达量,一般15-30μg就应该没有问题,不过选用β-actin做对照,建议用另一块12%的胶跑β-actin,这样可以使目的蛋白和对照条带宽度大概一致。
1 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1】 2 制胶流程(以一块0.75/ 1.0/ 1.5 mm的胶为例) 1)取等体积分离胶缓冲液和分离胶溶液混匀,即取两种溶液各2.0/ 2.7/ 4.0 mL。 2)往步骤1中的混合溶液中加入40/55/80 μL的改良型过硫酸铵溶液(凝固太快可减半过硫酸铵使用量),充分混匀。
浓度越高,胶孔径越小,可分离的蛋白分子量越小,具体看你目的蛋白分子量。
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。 I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2) 1.参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。 注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。 2.将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Separating...
推荐使用15%的聚丙烯酰胺凝胶电泳(可购买百奥莱博预制胶产品获得更高效、更便捷的体验)。其他浓度并非不适用,建议进行预实验选用最适合的体系及胶浓度。浓度太低时,低分子量蛋白迁移速度快于溴酚蓝;浓度太高时,高分子量蛋白分离效果不好,有可能聚集于分离胶的上部; ...
蛋白质电泳 目的:分离蛋白质混合物