电转化感受态细胞最后一次洗涤为何要使用10%甘油？这一过程在大肠杆菌电转化感受态细胞制备中至关重要。甘油作为洗涤剂，能够有效地保护细胞免受干燥伤害，并提供稳定的渗透压环境，确保细胞在电转化过程中保持活性。第一天的准备工作包括选择适合菌株（例如XL1-Blue或DH5α），将其接种到LB或其他营养丰富的...
10×GY溶液(10%甘油) 英文名:10×Glycerol Solution储存条件:2-8℃ 产品说明: 以下培养基组分(表一),可用于配制毕赤酵母MD、RD、MM、BMM、MGY、BMG系列培养基,均经过滤除菌或高压灭菌。MD培养基既可以筛选his4标记,也可以筛选ade2标记。适用的酵母菌株包括GS115、X33、KM71、SMD1168、PichiaPink strain等。RD...
同问，为什么要用10%的甘油，其他浓度是否可以？
电转化最后一步加甘油洗涤的目的是感受态在-80℃冻存时起到保护作用。因为甘油在溶液中易结合水分子发生...
10%甘油(100 ml/L) 100ml 备注:用0.1NHCl调pH至6.4(pH过高会使锰离子变成二氧化锰沉淀)。 无菌过滤后在4℃保存待用。 轻微的深色沉淀不影响其使用效果。 步骤: 1.把TOP 10菌种接种至固体LB培养基中37℃过夜培养12 h。 2.挑取大小适当菌落至含10ml LB液体培养基的50 ml玻璃瓶中,置于37℃恒温摇床中过夜培...
电转化感受态细胞最后一次洗涤为什么要用10%甘油洗 大肠杆菌电转化感受态细胞制备 第一天： 1. 将适合菌株（如XL1-Blue, DH5α）置于LB或其他营养丰富的培养基上，在37°C下过夜培养 2. 高温灭菌大的离心瓶（250-500ml）以备第二天摇瓶用 3. 准备几瓶灭菌水（总量约1.5升），保存于冷冻室中...
电转化感受态细胞最后一次洗涤为什么要用10%甘油洗 大肠杆菌电转化感受态细胞制备第一天：1.将适合菌株（...
大肠杆菌DH10B(Streptomycin resistant)电转化感受态制备 1.从保存的甘油管中取出200L菌液到100 mL的LB液体中,37oC,200 rpm培养约13~16小时后(对数期),按2%接种到SOB培养基中; 2.37oC,约2~2.5小时后,OD600约0.5左右,取出,冰上缓慢摇育30 min。 3.预先4oC降温的冷冻离心机离心收集菌体,用预冷的离心管,并...
电击大肠感受态TOP10的制作1L三角瓶,牙签,SSLB板,0.5-1LYENB培养基,预冷离心机,灭菌的6-12个50mL离心管和一大包1.5mL离心管,10%甘油1L。1LY..
然后用0.1mol的氯化钙处理20min;在4000rmp/min,4℃下离心5min收集细胞。最后,悬浮在1ml含10%甘油的0.1mol氯化钙中。 共转化:将ppicza-a和pcp20线性片段共同转化到化学感受态e.coligpe10细胞中,于37℃复苏培养1h,在37℃培养箱中过夜培养,挑取单克隆验证,获得阳性克隆pcp-ble。