SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)是一种常用的蛋白质分析方法,它基于蛋白质的分子大小和电荷差异,将混合的蛋白质样品在聚丙烯酰胺凝胶中进行分离。该方法主要依赖于SDS(十二烷基硫酸钠,即十二烷基硫酸钠),一种带有负电荷的表面活性剂。 在SDS-PAGE中,蛋白质样品首先经过加入SDS、还原剂(如巯基乙醇)和热处理,使得蛋白质...
严格按照试剂盒说明书操作。 5.蛋白质印迹法:提取总蛋白质,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳后切下含目的条带的分离胶,转膜、封闭、孵育抗体、曝光,胶片晾干后进行扫描分析。 6.免疫组织化学:标本常规脱水、包埋、切片,滴加一抗(1∶100稀释)、...
收集标记的条件培养基,并在非还原条件下在10-20%凝胶中进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE;Laemmli,Nature227680,1970),凝胶干燥后用标准方法和Kodak XAR胶片进行放射自显影。 放射自显影显示出人IL-10;拮抗剂K157E、CΔ3和CΔ4及激动剂NΔ7和NΔ10的不同标记条带,所有条带都迁移在表观分子量约...
D.280nm E.260nm '【答案】'.E 137.SDS-PAGE 是十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,十二烷基硫酸钠作用是 A.解离蛋白 B.分离与纯化 C.催化聚合 D.等电聚焦 E.交变脉冲 '【答案】'.A 138.过滤式微生物采样器是使空气通过过滤材料来捕集微生物粒子的方法,根据过滤材料的不同分为 A.薄膜过滤器 B.玻...
可以通过Western印迹法进一步检测抗-IP-10人IgG与IP-10抗原的反应性。简要地说,制备IP-10并进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳。电泳后,将分离的抗原转移到硝酸纤维素膜上,用10%胎牛血清封闭,并用所检测的单克隆抗体探查。人IgG的结合可以用抗人IgG碱性磷酸酶检测,并用BCIP/NBT底物片(Sigma Chem.Co.,St.Loui...
染胶指使用染料对聚丙烯酰胺凝胶进行染色,以便能在紫外线下观察到DNA带条。 常用的方法有: 1. 考马斯蓝染色:使用考马斯蓝染料,可以染色DNA中的鸟嘌呤和胞嘧啶,使其呈现蓝色,用于判断DNA的来源和碱基组成。这是最常用的染胶方法。 2.银染:使用银染料,可以非特异性地将DNA中的碱基染成棕色,用于检测微量DNA。它...
方法 不同条件下诱导pET16b-wbbL质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达;建立外源重组蛋白质与分子伴侣在大肠埃希菌中的共表达体系,优化其表达条件;超声破碎诱导表达的大肠埃希菌,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物;免疫蛋白印迹(Western blotting)法对重组蛋白质进行鉴定.结果 共表达体系优化表达的...
10% SDS SDS即Sodium dodecyl sulfate,中文名为十二烷基磺酸钠,也称十二烷基硫酸钠。 常用生化试剂,用途广泛,进口试剂配制,可以用于SDS-PAGE、细菌碱裂解等。 10% SDS为100毫升溶液中含有10克SDS,该溶液用水配制。
采采用新鲜和复原的牛羊乳为原料,等电点沉淀,通过洗涤、干燥等步骤分别制得牛乳和羊乳酪蛋白,用凯氏定氮法对其进行定量检测,应用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)分析比较牛羊乳酪蛋白组分差异。结果表明:牛乳酪蛋白得率为86.75%,羊乳酪蛋白得率为90.55%,高含量的酪蛋白主要集中在电泳图谱的中分子量组,...
通常,根据其在非还原十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳上以单体迁移,表明该二聚体为非共价键合。重组人IL-10可由原核和真核两种表达体系表达。真核表达体系中生产的重组人IL-10的N-末端分析表明小百分率的IL-10多肽有最初的两个N-末端氨基酸残基缺损。该截尾肽称作△2IL-10多肽,或简称△2。因此全长链称作△0...